[發明專利]特異性結合幽門螺旋桿菌的核酸適配體、生物元件、生物傳感器及檢測方法

有效

• 申請號: 202110847835.0
• 申請日: 2021-07-27
• 公開（公告）號: CN113388616B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 池哲;劉晨光;王壯壯
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;C12N15/10;G01N33/569;G01N33/58
• 代理公司: 南京泉為知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32408
• 代理人: 許丹丹

1.一種特異性結合幽門螺旋桿菌的核酸適配體，其特征在于，所述核酸適配體的序列如SEQ ID NO.5所示。

2.如權利要求1所述的核酸適配體在制備檢測幽門螺旋桿菌的試劑中的應用。

3.如權利要求1所述的核酸適配體在制備檢測幽門螺旋桿菌的試劑盒或者生物傳感器中的應用。

4.一種特異性捕獲幽門螺旋桿菌的第一生物元件或特異性結合幽門螺旋桿菌的第二生物元件，其特征在于，所述第一生物元件包括核酸適配體修飾的超順磁性納米粒子；所述核酸適配體的序列如SEQ ID NO.5所示；所述第二生物元件為血紅素-聚乙二醇-去鐵胺共聚物，所述血紅素-聚乙二醇-去鐵胺共聚物通過異雙官能化聚乙二醇兩端分別連接氯化血紅素和去鐵胺得到。

5.根據權利要求4所述的特異性捕獲幽門螺旋桿菌的生物元件，其特征在于，所述超順磁性納米粒子摻雜有鈣離子；所述異雙官能化聚乙二醇為NH₂-PEG-COOH，分子量為5000。

6.一種特異性捕獲幽門螺旋桿菌的第一生物元件或特異性結合幽門螺旋桿菌的第二生物元件的制備方法，其特征在于，所述第一生物元件通過以下方法制備：以EDC和NHS活化超順磁性納米顆粒表面羧基后，與5’端修飾氨基的SEQ ID NO.5所示的核酸適配體混合孵育制得；所述第二生物元件通過以下方法制備：通過異雙官能化聚乙二醇在EDC和NHS的催化下，將氯化血紅素和去鐵胺進行連接，合成血紅素-聚乙二醇-去鐵胺共聚物。

7.一種用于檢測幽門螺旋桿菌的生物傳感器或試劑盒，其特征在于，所述生物傳感器或者試劑盒包括第一生物元件、第二生物元件以及第三生物元件；所述第一生物元件為：如SEQ ID NO.5所示的核酸適配體修飾的超順磁性納米粒子；所述第二生物元件為血紅素-聚乙二醇-去鐵胺；所述第三生物元件為負載有Fe³⁺的碳量子點。

8.根據權利要求7所述的用于檢測幽門螺旋桿菌的生物傳感器或試劑盒，其特征在于，所述的第一生物元件的濃度為1.0mg/mL，所述的第二生物元件的濃度為4.0 mg/mL，第三生物元件中：Fe³⁺的濃度為2.4nM，碳量子點溶液的濃度為20ng/mL。

9.一種如權利要求7所述的用于檢測幽門螺旋桿菌的生物傳感器或試劑盒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一生物元件的制備：以EDC和NHS活化超順磁性納米顆粒表面羧基后，與5端修飾氨基的本發明提供的核酸適配體混合孵育制得第一生物元件；

第二生物元件的制備：通過異雙官能化聚乙二醇，在EDC和NHS的催化下，將氯化血紅素和去鐵胺進行連接，合成為共聚物血紅素-聚乙二醇-去鐵胺；

第三生物元件的制備：通過F^e3+與碳量子點溶液混合制得；

將制備的三個生物元件共同組成檢測幽門螺旋桿菌的生物傳感器或試劑盒。

10.一種用于糞便樣品幽門螺旋桿菌檢測的試劑盒，其特征在于，包括如權利要求8所述的生物傳感器或者試劑盒和用于富集糞便樣品的微流控芯片。