[發明專利]一種外泌體藥物遞送系統及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110847366.2
• 申請日: 2021-07-27
• 公開（公告）號: CN113292608B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發明（設計）人: 葛嘯虎;程國鋼;王達;陸路;王淼;韓春樂;陳寧;馬德美
• 申請（專利權）人: 天九再生醫學（天津）科技有限公司
• 主分類號: C07F15/00
• 分類號: C07F15/00;A61K33/243;A61K47/54;A61K47/69;A61P35/00
• 代理公司: 天津諾德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 12213
• 代理人: 欒志超;王旭

本發明公開一種外泌體藥物遞送系統及其制備方法和應用，提供一種利用磷脂化合物將順鉑前藥裝載在外泌體上的主動載藥系統，解決外泌體載藥策略導致膜破裂和載藥量低等問題；本發明預先制備順鉑藥物前體，將其制備成脂質體后，再于外泌體混合實現主動載藥，利用了磷脂類化合物與外泌體膜的融合作用，保護了外泌體膜的完成性，而且提高了外泌體對抗癌藥物的載藥量。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，尤其是涉及一種外泌體藥物遞送系統及其制備方法和應用。

背景技術

外泌體(exosomes)是一種直徑在30-150nm之間的茶托型結構的小囊泡，包含RNA、蛋白質、microRNA、DNA片段等多種成分。全部真核細胞和一些原核細胞均可分泌，主要分布在血液、唾液、尿液、羊水和母乳等多種體液中。它是由細胞質膜內陷形成早期的核內體，核內體內陷包裹物質形成多泡體，而后多泡體在與質膜融合后得以釋放。正是外泌體的結構（磷脂雙分子層和囊泡狀結構）和生理特性，使它們具有很好的生物相容性。并且外泌體可以自由的穿過血腦屏障（BBB），低免疫原性和毒性使其可以很容易的被任何器官和組織中的細胞攝取，且不會引起機體的免疫反應，具有無毒、生物相容性好、組織和腫瘤靶向性和循環半衰期長等優點，是新型藥物遞送系統的理性候選者。

外泌體作為有效藥物遞送載體的關鍵是外泌體對治療藥物的“裝載”。如今的裝載策略大致分兩類：被動和主動裝載。無論是被動轉載和主動轉載策略，外泌體的載藥量都受到候選藥物親水性、疏水性、藥物分子量的影響，同時外泌體膜的完整性也是檢驗載藥策略好壞的重要因素。被動裝載的原理是利用治療藥物的由高濃度向低濃度的擴散，使藥物被動穿過磷脂雙分子層。此方法對候選藥物要求很高，即容易穿過磷脂雙分子膜結構又不易降解。主動裝載是相對于被動裝載提出的概念，是一種以增加載藥量和擴大候選藥物范圍為目的的策略總稱。主要包括：超聲、擠壓、電轉和藥物交聯等技術，且電轉策略是運用最為廣泛。電轉則是利用電場使外泌體膜上產生諸多暫時性的小孔，藥物同樣是以擴散的方式進入到外泌體中，再利用磷脂膜的流動性使小孔恢復完成藥物裝載。現階段，外泌體作為遞送載體的載藥量較低，僅有少部分策略的載藥量能達1%。同時，載藥過程中外泌體膜的完整性也困擾著廣大的研究學者。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供一種外泌體藥物遞送系統及其制備方法和應用。

本發明采用的技術方案是：一種順鉑藥物前體，結構如式1所示，

式 1；

其中，n為10、11、12、13或14。

制備順鉑藥物前體的方法，其特征在于：具體步驟如下：

步驟一使用H₂O₂活化順鉑(CDDP)獲得二羥基二胺二氯鉑；

步驟二將二羥基二胺二氯鉑與琥珀酸酐酯化反應獲得琥珀酸羥基二胺二氯鉑；

步驟三將琥珀酸羥基二胺二氯鉑與磷脂酰乙醇胺通過酰胺鍵反應獲得式1所示藥物前體。

優選地，步驟一中活化溫度為55-80℃，避光攪拌4.5-7.5h，4℃冷卻2h；

優選地，活化溫度為70℃，活化時間為6h。

優選地，步驟二以4-二甲氨基吡啶(DMAP)為催化劑，二羥基二胺二氯鉑與琥珀酸酐的摩爾比為1：1-3；反應溫度為60-80℃，攪拌3h；

優選地，步驟二中二羥基二胺二氯鉑與琥珀酸酐的摩爾比為1:1，反應溫度為75℃。

優選地，在步驟三中加入N-羥基丁二酰亞胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)作為催化劑；

優選地，琥珀酸羥基二胺二氯鉑與磷脂酰乙醇胺的摩爾比為1:4，反應溫度為24-40℃，避光反應16h。