[發(fā)明專利]制備主要組織相容性復(fù)合物基因修飾小鼠的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202110831383.7
• 申請日: 2012-10-26
• 公開（公告）號: CN113564188A
• 公開（公告）日: 2021-10-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: L·麥克唐納;A·J·莫菲;C·古雷爾;J·麥克沃克;V·沃羅寧那;F·哈里斯;S·史蒂文斯
• 申請（專利權(quán)）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N5/10;C12N15/12;C12N15/85;C07K19/00;A01K67/027
• 代理公司: 北京市君合律師事務(wù)所 11517
• 代理人: 張怡;汪燁君

1.一種核酸，其包含編碼嵌合人源/非人源MHC I多肽的核苷酸序列，

其中所述核苷酸序列包含編碼人HLA I類多肽的α1、α2和α3結(jié)構(gòu)域的第一核酸序列，其可操作地連接至編碼非人源MHC I多肽的跨膜和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的第二核酸序列。

2.一種分離的細胞，其包含如權(quán)利要求1所述的核酸。

3.一種嵌合人源/非人源MHC I多肽，其包括所述嵌合人源/非人源MHC I多肽的人源部分，其中所述嵌合人源/非人源MHC I多肽的人源部分包含人HLA I類多肽的α1、α2和α3結(jié)構(gòu)域，所述人源部分可操作地連接至包含非人源MHC I多肽的跨膜和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域的所述嵌合人源/非人源MHC I多肽的非人源部分。

4.一種非人源基因組，所述基因組在內(nèi)源性非人源β2微球蛋白基因座包含核酸序列，所述核酸序列包含人β2微球蛋白基因的外顯子2、3和4，其中所述核酸序列編碼人β2微球蛋白氨基酸序列的多肽。

5.一種小鼠基因組，其在內(nèi)源性β2微球蛋白基因座包含核酸序列，所述核酸序列(1)包含小鼠β2微球蛋白基因的外顯子1和人β2微球蛋白基因的外顯子2、3和4，以及(2)可操作地連接至小鼠β2微球蛋白調(diào)控元件，

其中所述核酸序列編碼包含人β2微球蛋白氨基酸序列的多肽。

6.一種基因修飾小鼠的方法，包括在內(nèi)源性小鼠β2微球蛋白基因座用包括人β2微球蛋白基因外顯子2、3和4的核酸序列取代包括小鼠β2微球蛋白基因外顯子2、3和4的核酸序列。

7.一種核酸序列，所述核酸序列編碼嵌合人源/非人源β2微球蛋白多肽，其中所述核酸序列包含人β2微球蛋白基因外顯子2、3和4。

8.一種嵌合人源/非人源動物β2微球蛋白多肽，其包含人β2微球蛋白蛋白質(zhì)的氨基酸23-119。

9.一種分離的細胞，其包括如權(quán)利要求7所述的核酸序列和/或表達如權(quán)利要求8所述的嵌合人源/非人源動物β2微球蛋白多肽。

10.一種包含如權(quán)利要求9所述的分離的細胞的體外組合物。

11.一種鑒定預(yù)測抗原是否包含能夠生成HLA I類限制性免疫應(yīng)答的表位的方法，所述方法包括

將所述抗原或其部分與基因修飾的非人動物接觸，

使所述非人動物產(chǎn)生免疫應(yīng)答，并且

在所述非人動物中檢測特異性結(jié)合表達人源化MHC I復(fù)合物的遞呈所述抗原或其部分的肽序列的抗原遞呈細胞的細胞；

其中所述非人動物

(i)在內(nèi)源性主要組織復(fù)合物I(MHC I)基因座處表達嵌合人源/非人源MHC I多肽，所述內(nèi)源性主要組織復(fù)合物I(MHC I)基因座包含編碼人MHC I類多肽的α1、α2和α3結(jié)構(gòu)域的核苷酸序列，其可操作地連接至非人源MHC I多肽的跨膜和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，并且可選地

(ii)在內(nèi)源性非人β2微球蛋白基因座處表達人或人源化的β2微球蛋白多肽，所述內(nèi)源性β2微球蛋白基因座包含包括人β2微球蛋白基因外顯子2、3和4的核酸序列；

其中所述人源化的MHC I復(fù)合物包括嵌合人源/非人源MHC I多肽以及可選地人或人源化的β2微球蛋白多肽。