[發明專利]地耳草內生真菌菌株HUBU0121及其應用

有效

• 申請號: 202110825752.1
• 申請日: 2021-07-21
• 公開（公告）號: CN113355247B
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發明（設計）人: 胡琳珍;江雯;胡萍;童周;張雪珂
• 申請（專利權）人: 湖北大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/34;A01P1/00;A01P3/00;C12R1/66
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 張曉博

本發明涉及地耳草內生真菌菌株HUBU0121及其應用。該內生真菌命名為曲霉菌(Aspergillus sp.)HUBU0121，其菌種保藏單位為中國典型培養物保藏中心，保藏地址為湖北省武漢市八一路299號，保藏日期為2021年4月19日，保藏編號為CCTCC No:M2021413。該菌對沙門氏菌和水稻黃單胞菌具有抑菌作用，可作為植物內生真菌的利用資源，以為獲得抗植物病原真菌病害的新型農用抗生素類天然成分奠定基礎。

技術領域

本發明涉及地耳草內生菌技術領域，尤其涉及地耳草內生真菌菌株HUBU0121及其應用。

背景技術

地耳草(Hypericum japonicum Thunb.ex Murray)，別名香草、田基黃，是常用的藥用植物之一。地耳草分布廣泛，在中國主要分布于遼寧、山東至長江以南各省區，生長于海拔2800米以下比較潮濕的土地包括田邊、溝邊、草地以及撩荒地上。其全部組織和器官均能制成藥物，能清熱止血，有解毒消腫的作用，對治療慢性肝炎、跌打損傷以及傳染性瘡毒有顯著效果。

根據現代藥理學的最新研究結果顯示，地耳草中主要含有多種黃酮類、內酯類、酚類、糖類物質和鞣質，能在不同的程度上有效抑制多種致病菌，其中主要包括金黃色葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌等。據報道，地耳草的水提取物具有廣譜抑菌活性(除銅綠假單胞桿菌)。但是直接從植物中提取獲得抗菌活性成分存在一定的局限性，例如：產率通常僅為0.01％～0.03％；產物受季節、地理位置和環境、氣候等因素制約而影響其重現性；植物資源的過度開采使許多植物已瀕臨枯竭。

近年來科研工作者發現，具有特殊生理活性的代謝產物與特殊生長環境下的微生物存在緊密的關系，幾乎已經發現的所有植物中都會含有內生真菌，這些真菌長期生活在寄主植物內的微環境中，與寄主植物一起進化，而且在這個過程中它們還可能產生與其寄主植物或相同或相似的活性化學物質。然而，現有技術并未公開相關地耳草具有相關的內生微生物。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在提供一種地耳草內生菌，以其減少直接從地耳草內提取活性成分，減少對地耳草的過度開發。

第一方面，本發明實施例公開了一株地耳草內生真菌菌株HUBU0121，命名為曲霉菌(Aspergillus sp.)HUBU0121，保藏在中國典型培養物保藏中心，保藏地址為湖北省武漢市八一路299號，保藏日期為2021年4月19日，保藏編號為CCTCC No.M2021413。

第二方面，本發明實施例公開了第一方面涉及的地耳草內生真菌菌株HUBU0121或其代謝產物在制備抑菌劑中的應用。

在本發明實施例中，所述抑菌劑包括使用甲醇對所述地耳草內生真菌菌株HUBU0121的代謝產物進行提取的提取物。

在本發明實施例中，所述提取物的制備方法包括以下步驟：將地耳草內生真菌菌株HUBU0121于PDA培養基中發酵培養，得發酵液，純化提取即可得所述提取物。

在本發明實施例中，所述發酵過程中，先將地耳草內生真菌菌株HUBU0121接種于PDA的固體培養基上進行活化7天后，再將其轉接至含青霉素、鏈霉素的PDA液體培養基中進行發酵。

在本發明實施例中，所述發酵過程中，將發酵液用甲醇靜置浸泡提取，提取時間為6-8h，按此法連續提取3次后，過濾，濾液濃縮干燥即可得所述提取物。

在本發明實施例中，在甲醇浸泡過程中，還對發酵液進行了超聲處理，超聲頻率10～50KHz，并控制溫度40℃。

與現有技術相比，本發明至少具有以下有益效果：