[發明專利]一種核苷酸層析分離中5’-AMP和5’-UMP的回收應用

在審

• 申請號: 202110821876.2
• 申請日: 2021-07-19
• 公開（公告）號: CN113387987A
• 公開（公告）日: 2021-09-14
• 發明（設計）人: 徐浩;陳修足;邱蔚然;邱志云
• 申請（專利權）人: 南通秋之友生物科技有限公司
• 主分類號: C07H1/06
• 分類號: C07H1/06;C07H19/20;C07H19/10
• 代理公司: 深圳市賓亞知識產權代理有限公司 44459
• 代理人: 黃磊

本發明公開一種核苷酸層析分離中5’?AMP和5’?UMP的回收應用，包括以下步驟：陽樹脂再生；AMP、UMP混合上樣；水洗；洗脫；濃縮結晶；最終獲得成品5’?AMP和5’?UMP。本發明是利用5’?AMP和5’?UMP結構的不同，即5’?UMP無氨基，在酸性條件下電離不能帶正電荷，不被陽離子交換樹脂交換，而AMP有氨基，酸性條件下電離帶正電荷，可以被陽離子交換樹脂交換，所以通過陽離子交換樹脂可以分離兩種核苷酸，解決了部分AMP、UMP不能回收或回收后質量下降的問題，使總收率提高20％?30％；本發明通過不同濃度的鹽和堿鹽洗脫的探究，找到了既節約洗脫溶液又能得到高純度5’?AMP和5’?UMP的方法。

技術領域

本發明涉及核苷酸產品技術領域，具體涉及一種核苷酸層析分離中5’-AMP和5’-UMP的回收應用。

背景技術

核苷酸層析分離過程中5’-AMP和5’-UMP有約20％-30％交叉混合在一起，如果丟棄這部分會影響分離的收率，如果混在5’-AMP或5’-UMP中結晶會影響產品的質量；而且已有的陽柱工藝都是分離四種核苷酸，且洗脫方法一般都是用大量的水洗脫收集四種核苷酸，這樣不僅用水量非常大，而且收到和核苷酸有交叉，得到的核苷酸產品純度低。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的缺陷和不足，提供一種核苷酸層析分離中5’-AMP和5’-UMP的回收應用。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是：一種核苷酸層析分離中5’-AMP和5’-UMP的回收應用，其創新點在于，包括以下步驟：

S1、陽樹脂再生：陽樹脂堿酸再生，水洗至pH＝3.0-4.0，洗掉樹脂上的雜質，讓樹脂帶電荷，待用；

S2、AMP、UMP混合上樣：AMP和UMP混合物稀釋至濃度20-30g/L，調pH＝2.0-2.5，上樣，AMP被吸附，UMP不被吸附直接流出至碳柱中富集；

S3、水洗：上樣結束后，AMP和UMP分別采用4倍柱體積水洗；

S4、洗脫：采用堿鹽將AMP洗脫下來；采用堿乙醇將UMP洗脫下來；

S5、濃縮結晶：洗脫的AMP和UMP濃縮結晶得到成品AMP和UMP。

進一步的，所述步驟2中，AMP采用陽柱進行吸附，UMP采用碳柱進行吸附。

進一步的，所述步驟4中，分別用0.5M堿洗脫、2％NaCl洗脫、3％NaCl洗脫、4％NaCl洗脫、5％NaCl洗脫、4％NaCl洗脫+0.2M NaOH、4％NaCl洗脫+0.4MNaOH洗脫液進行AMP的洗脫。

本發明有益效果為：

1、本發明是利用5’-AMP和5’-UMP結構的不同，即5’-UMP無氨基，在酸性條件下電離不能帶正電荷，不被陽離子交換樹脂交換，而AMP有氨基，酸性條件下電離帶正電荷，可以被陽離子交換樹脂交換，所以通過陽離子交換樹脂可以分離兩種核苷酸，解決了部分AMP、UMP不能回收或回收后質量下降的問題，使總收率提高20％-30％；

2、本發明通過不同濃度的鹽和堿鹽洗脫的探究，找到了既節約洗脫溶液又能得到高純度5’-AMP和5’-UMP的方法。

附圖說明

圖1為本發明的工藝流程示意圖；

圖2為實施例1的洗脫效果示意圖；

圖3為實施例2的洗脫效果示意圖；

圖4為實施例3的洗脫效果示意圖；

圖5為實施例4的洗脫效果示意圖；

圖6為實施例5的洗脫效果示意圖；

圖7為實施例6的洗脫效果示意圖；