[發明專利]一種生物分子及抑制劑類分子的檢測方法

在審

• 申請號: 202110814009.6
• 申請日: 2021-07-19
• 公開（公告）號: CN113552122A
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發明（設計）人: 胡瓊政;平建濤;趙冰璐
• 申請（專利權）人: 山東省分析測試中心
• 主分類號: G01N21/80
• 分類號: G01N21/80;G01N21/84
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 鄭平

1.一種生物分子的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：將待測物與粘性溶液或水凝膠混合，形成混合溶液，置于指示性試紙條一端，不同量的目標檢測物引起粘性溶液或水凝膠的水解程度不同，因此粘性溶液或水凝膠分解釋放出的水的含量不同，會在pH試紙條上產生不同距離的移動，通過移動距離的長短實現對目標檢測物的檢測。

2.如權利要求1所述的生物分子的檢測方法，其特征在于，所述粘性溶液或水凝膠為水凝膠、透明質酸，明膠溶液，淀粉溶液，葡萄糖溶液、果膠溶液、海藻酸鈉溶液、瓊脂溶液、黃原膠溶液、槐豆膠溶液、甲基纖維素熱溶液；

優選的，所述待測物為植物多糖或動物多糖；

優選的，所述待測物為果聚糖、甘露聚糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、粘多糖、殼聚糖；微生物多糖如肽聚糖；海藻多糖；蛋白質類物質；

進一步優選的，所述蛋白質類物質為酶，優選為淀粉酶、葡萄糖氧化酶、半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠脂酶、瓊脂糖酶、黃原膠液化酶、甘露聚糖酶、纖維素酶；

優選的，所述粘性溶液或水凝膠為水凝膠，所述水凝膠與待測物有如下性質：水凝膠隨待測物的濃度變化，分解能力增強；

優選的，所述水凝膠為明膠類水凝膠體系、透明質酸類水凝膠體系、DNA類水凝膠體系；

優選的，所述水凝膠為明膠類水凝膠體系，待測物為血清中胰蛋白酶；

優選的，所述水凝膠為透明質酸類水凝膠體系，待測物為透明質酸酶；

優選的，所述水凝膠為DNA類水凝膠體系，待測物為DNA剪切酶、赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)；

進一步優選的，所述水凝膠為磷酸活化后的明膠，待測物為血清中胰蛋白酶；

進一步優選的，磷酸在明膠中的比例為1-5wt％，進一步優選為5wt％；

優選的，所述粘性溶液或水凝膠為透明質酸，透明質酸的濃度為0.2-1wt％，進一步優選為1wt％。

3.如權利要求1所述的生物分子的檢測方法，其特征在于，所述指示性試紙條為pH試紙條，聚酯膜類試紙條、碳纖維素膜類試紙條、玻璃纖維類試紙條中的一種，優選為pH試紙條；

進一步優選的，所述pH試紙條為常用廣范試紙條，pH范圍為1-14。

4.如權利要求1所述的生物分子的檢測方法，其特征在于，所述生物分子濃度的檢測方法在疏水性基板上進行，先將混合溶液滴在疏水性基板上，一段時間后，再將指示性試紙條一端置于液滴上表面；

優選的，所述疏水性基板材料包括聚碳酸酯板、聚苯乙烯板、聚甲基丙烯酸甲酯板、PVC板等中的一種；

優選的，所述一段時間為3-7分鐘，進一步優選為5分鐘。

5.如權利要求1所述的生物分子的檢測方法，其特征在于，還包括粘性溶液或水凝膠濃度的優化過程，包括如下步驟：使用磷酸鹽緩沖溶液配置不同質量濃度的粘性溶液或水凝膠溶液，分別將其滴加到疏水性基底板上，觀察液滴在一段時間后的是否可以變成凝膠，此時選擇液滴變成凝膠狀態時對應的粘性溶液或水凝膠濃度作為最適濃度，用于下一步檢測；

優選的，所述一段時間為1-30分鐘，進一步優選為5分鐘；

或，還包括疏水性基底板清洗過程，包括如下步驟：使用乙醇和去離子水的混合溶液超聲清洗多次；

優選的，乙醇和去離子水的體積比為1:1.5-2.5，進一步優選為1:2；

優選的，超聲次數為3-5次，進一步優選為3次；

優選的，每次超聲時間為4-6分鐘，進一步優選為5分鐘；

或，還包括待測樣品孵育過程，包括如下步驟，待檢測樣品與水凝膠溶液混合，將混合溶液置于合適溫度環境下孵育一段時間；

優選的，所述檢測樣品與水凝膠溶液體積比為1:1.2，優選為1:1；

優選的，將混合溶液置于37℃環境下孵育15分鐘。

6.如權利要求1所述的生物分子的檢測方法，其特征在于，還包括指示性試紙條刻度獲取過程，包括如下步驟：將不同標準濃度的待測物與分別水凝膠混合，分別置于指示性試紙條一端，將濃度對應的刻度記錄，用于后續對目標檢測濃度進行對照。