[發(fā)明專利]一種玉米醇溶蛋白-多酚共價復(fù)合物及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110813359.0
• 申請日: 2021-07-19
• 公開（公告）號: CN113475620B
• 公開（公告）日: 2023-05-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 魏子淏;徐雅男;薛長湖
• 申請（專利權(quán)）人: 中國海洋大學(xué)
• 主分類號: C07K1/107
• 分類號: C07K1/107;C07K1/10;A23J3/14
• 代理公司: 北京知企鴻蒙專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11692
• 代理人: 劉帥帥

1.一種玉米醇溶蛋白–多酚共價復(fù)合物的制備方法，其特征在于，包括下列步驟：

1）稱取一定量的玉米醇溶蛋白溶于70%?(v/v)的乙醇-水溶液中，超聲5?min，200?rpm攪拌30?min，使其完全溶解；

2）稱取一定量多酚溶于70%?(v/v)的乙醇-水溶液中，超聲5?min，200?rpm攪拌30?min使其完全溶解；

3）在4℃下，向步驟2）的多酚溶液中加入一定量的EDC，隨后加入一定量的NHS，隔絕氧氣300?rpm連續(xù)攪拌反應(yīng)0.5–2?h；

4）將步驟3）的多酚溶液緩慢加入步驟1）的玉米醇溶蛋白溶液中，將pH調(diào)至6.5，在300rpm連續(xù)攪拌的條件下，4℃，隔絕氧氣反應(yīng)1?h，之后25℃下反應(yīng)24?h；

5）在反應(yīng)過程中，每隔四個小時測量反應(yīng)液的pH，通過加入0.1M的NaOH?和0.1M的HCl維持pH在固定值；

6）反應(yīng)結(jié)束后，將混合物過超濾裝置，將超濾得到的液體置于超聲中透析；

7）將透析后的樣品用納米研磨機處理，經(jīng)預(yù)凍，冷凍干燥后得到玉米醇溶蛋白–多酚共價復(fù)合物；

其中所述步驟1）混合體系中玉米醇溶蛋白的濃度為5?mg/mL–25?mg/mL；步驟2）中多酚的濃度為2–30?mmol/L；步驟3）中EDC的量為多酚添加量的1–5倍，NHS的添加量為多酚的1–3倍；

所述步驟4）混合體系中玉米醇溶蛋白與多酚的質(zhì)量比為1.5:1–10:1；

多酚選自綠原酸(CGA)、沒食子酸(GA)、咖啡酸、原兒茶酸、迷迭香酸的一種。

2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的玉米醇溶蛋白–多酚共價復(fù)合物的制備方法，其特征在于，步驟6）中超濾膜的分子量選擇30?kDa，透析袋的分子量選擇3500?Da，透析時間48?h，透析溫度?4℃。

3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的玉米醇溶蛋白–多酚共價復(fù)合物的制備方法，其特征在于，步驟7）中預(yù)凍條件為–40℃預(yù)凍24?h，冷凍干燥的時間為48?h。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的玉米醇溶蛋白–多酚共價復(fù)合物的制備方法，其特征在于，EDC的量為多酚添加量的3倍，NHS的添加量為多酚的2倍。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玉米醇溶蛋白–多酚共價復(fù)合物的制備方法，其特征在于，其中所述步驟1）中添加0.001%w/v的山梨酸鉀。