[發(fā)明專利]一種能夠抑制SOCS3下調(diào)的微小RNA抑制劑及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110798974.9
• 申請(qǐng)日: 2021-07-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113528525B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-05-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姜春懿;劉文濤;韓園;潘寅兵;胡亮;王玉;田田;萬(wàn)莉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;C12N15/10;A61K31/7105;A61P25/00
• 代理公司: 蕪湖思誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 34138
• 代理人: 宦曉軍

本發(fā)明公開(kāi)了一種能夠抑制SOCS3下調(diào)的微小RNA抑制劑及其制備方法，微小RNA抑制劑包含如下RNA序列：5’?CUUCCAGUCGAGGAUGUUUACA?3’。本發(fā)明中的微小RNA抑制劑是進(jìn)行了2’?Ome化學(xué)修飾的microRNA?30a?5p的抑制劑，通過(guò)特異的靶向抑制microRNA?30a?5p，抑制內(nèi)源性microRNA?30a?5p的基因沉默效應(yīng)，提高SOCS3的蛋白表達(dá)量，改善神經(jīng)炎癥緩解嗎啡耐受，具有靶向性強(qiáng)、安全性高、有效性強(qiáng)以及穩(wěn)定性高的優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因調(diào)控技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種能夠抑制SOCS3下調(diào)的微小RNA抑制劑及其制備方法。

背景技術(shù)

嗎啡作為阿片類的代表藥物，是治療各種原因引起的劇烈疼痛的金標(biāo)準(zhǔn)，但是長(zhǎng)期暴露于嗎啡會(huì)帶來(lái)嚴(yán)重的副作用，例如耐受性，即隨著藥物的重復(fù)使用，藥效降低，需要加大用藥劑量或者縮短給藥間隔，才能維持原有藥效。嗎啡耐受是極具挑戰(zhàn)的臨床問(wèn)題，限制了其在疼痛治療中的臨床應(yīng)用。目前有大量關(guān)于嗎啡耐受機(jī)制的報(bào)道，主要包括阿片受體數(shù)量下調(diào)[1]、抑制性神經(jīng)元的變化[2]以及神經(jīng)炎癥[3]等。越來(lái)越多的研究表明，嗎啡耐受是一種包含多重行為和細(xì)胞適應(yīng)性的現(xiàn)象，其中包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的細(xì)胞、突觸和網(wǎng)絡(luò)水平的神經(jīng)元可塑性的改變。炎癥因子(如IL-1β、IL-6、TNF-α等)在嗎啡耐受中的作用被廣泛研究。

在基礎(chǔ)研究中，有文獻(xiàn)報(bào)道通過(guò)抑制神經(jīng)炎癥緩解嗎啡耐受的藥物主要有AMPK激動(dòng)劑(二甲雙胍)[4]、全麻藥(氯胺酮)[5]、局麻藥(利多卡因)[6]、抗抑郁藥物(文拉法辛)[7]和自噬激動(dòng)劑(雷帕霉素)[8]等，但是在臨床上，目前并沒(méi)有公認(rèn)的治療嗎啡耐受的特效藥。

SOCS3(Suppressor?of?cytokine?signaling?3，抑制細(xì)胞信號(hào)因子3)是一個(gè)重要內(nèi)源性抑炎蛋白，SOCS3被鑒定為許多細(xì)胞內(nèi)和病理事件交叉路口的關(guān)鍵蛋白[9]。眾多研究表明，SOCS3基于對(duì)腫瘤還死因子(TNF)受體相關(guān)因子6(TRAF6)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β激活激酶(TAK1)的抑制作用[10]，阻斷TLR4信號(hào)通路，從而抑制炎癥因子白介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)以及白介素1β(IL-1β)的釋放，發(fā)揮抑制炎癥作用。目前已有關(guān)于SOCS3在多種疾病模型中發(fā)揮抗炎作用的報(bào)道，我們前期數(shù)據(jù)已證明，芍藥苷通過(guò)上調(diào)SOCS3抑制熱休克蛋白70(HSP70)/toll樣受體4(TLR4)信號(hào)通路抑制神經(jīng)炎癥緩解術(shù)后痛。此外，利多卡因作為一種局麻藥和抗心律失常藥能夠通過(guò)激活磷酸腺苷激活蛋白激酶(adenosine?monophosphate-activated?protein?kinase，AMPK)上調(diào)SOCS3蛋白水平抑制炎癥因子的釋放，改善神經(jīng)炎癥，緩解嗎啡耐受[6]，但是AMPK如何上調(diào)SOCS3的具體機(jī)制尚不清楚，目前也并無(wú)報(bào)道。在此項(xiàng)工作中，吸引我們的數(shù)據(jù)是，利多卡因激活A(yù)MPK對(duì)SOCS3的調(diào)控僅僅發(fā)生在蛋白水平，而對(duì)mRNA水平并沒(méi)有影響。我們猜測(cè)AMPK激活后上調(diào)SOCS3可能是一種轉(zhuǎn)錄后調(diào)控。AMPK是一種絲氨酸/蘇氨酸代謝敏感性蛋白激酶，哺乳動(dòng)物的AMPK能被細(xì)胞能量狀態(tài)的下降所激活，提示AMP/ATP和ADP/ATP比率的上升。越來(lái)越多研究表明激活A(yù)MPK是治療多種代謝性疾病的有效途徑，例如糖尿病[11]、肥胖[12]以及炎癥[13]等，并且通過(guò)激活A(yù)MPK可以有效啟動(dòng)自噬[14]，維持細(xì)胞的分解代謝和合成代謝所需要的能量。但是廣泛激活A(yù)MPK亦會(huì)帶來(lái)眾多負(fù)面影響，例如激活A(yù)MPK后啟動(dòng)自噬，通過(guò)為腫瘤細(xì)胞提供必要的營(yíng)養(yǎng)成份，維持腫瘤細(xì)胞的生存，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[15]。眾所周知，在臨床上，嗎啡多用于治療癌痛，因此廣泛激活A(yù)MPK并不是治療嗎啡耐受的最佳選擇。基于以上事實(shí)，尋找AMPK調(diào)控SOCS3的中間關(guān)鍵分子，可能會(huì)成為緩解嗎啡耐受的全新靶標(biāo)分子。