[發明專利]一種預測兒童哮喘發作的組合試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202110798569.7
• 申請日: 2021-07-15
• 公開（公告）號: CN113533748A
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 周鷹;崔玉寶;郁思彥
• 申請（專利權）人: 無錫市兒童醫院
• 主分類號: G01N33/72
• 分類號: G01N33/72;G01N33/68;G01N33/53
• 代理公司: 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙) 11531
• 代理人: 趙艷

本發明公開了一種預測兒童哮喘發作的組合試劑盒及其應用，本發明通過采集哮喘患兒急性期、緩解期外周血，經TMT ^TM標記的定量蛋白質組學技術檢測，生物信息學分析差異表達的蛋白質，獲得目標蛋白、建庫，然后再經PRM靶向蛋白質組學技術對靶標蛋白進行定量分析，獲得一個血漿蛋白標志物組合，通過用ELISA方法檢測哮喘患兒外周血清確定各標志物及其組合在臨床上的應用價值，在此基礎上，本發明通過了一種組合試劑盒用于檢測血漿標志物組合，通過該檢測結果來預測哮喘發作，該預測結果具有較高的診斷靈敏度和特異度，有望成為哮喘發作的實驗室診斷指標。

技術領域

本發明屬于生物醫藥開發技術領域，尤其涉及一種預測兒童哮喘發作的組合試劑盒及其應用。

背景技術

哮喘是一種慢性氣道疾病，表現為可逆性氣流阻塞、呼吸困難、喘息、咳嗽、不同程度的氣道炎癥和支氣管高反應性等。盡管人們已經在數百年前就知道哮喘病，但是仍然沒有金標準用于哮喘病診斷。

氣道高反應性(airway hyperresponsiveness，AHR)檢測有助于有癥狀患者的診斷，但是AHR的作用是有限的：盡管AHR檢測可用于排除哮喘，但是對于非哮喘患者，對于無癥狀但有變應性炎癥患者，其氣道也呈高反應性。有報道20％～30％成人哮喘患者為過度診斷。

纖維支氣管鏡曾經被認為是診斷哮喘病最重要的手段，盡管其能夠精確地侵入氣道進行檢測，但是價格昂貴、操作繁瑣，稍微操作不當就會造成組織穿孔和出血，不能實施批量檢測，也不能在初級醫療機構常規開展。

長期以來，尋找血清學指標成為診斷哮喘病的重要研究方向之一，因為外周血樣本容易獲得，容易在臨床推廣應用。迄今為止，任何單個血清標志物均不能用于準確判斷患者病情程度。盡管文獻報道了許多血清標志物用于哮喘病診斷，但是其臨床轉化應用鮮見報道。數個隊列研究使用數據驅動的方法(data-driven approaches)鑒定出不同臨床表型的哮喘患者，但是不同研究獲得的危險因素不一致，即設定的同一表型仍然具有異質性；數個文獻使用數據驅動技術辨別不同表型哮喘病的治療效果，結果表明它們的治療效果相似。敏感度好、特異度好的血清標志物不僅可以鑒別不同表型的兒童哮喘，還有助于個性化用藥的選擇，以及預測治療效果。因此，全面系統闡述哮喘發生發展，包括臨床癥狀、與遺傳相關的血清標志物、與肺功能相關的血清標志物，對有助于開發更加有效的治療策略。

蛋白質組學(Proteome)概念誕生于20世紀90年代，是指利用高分辨的蛋白質分離技術和高效的蛋白質鑒定技術在蛋白質水平全面、動態和定量地觀察生命現象及規律，包括蛋白質的表達水平、翻譯后修飾、蛋白質與蛋白質的相互作用，對映于基因組表達的所有蛋白質的集合，即細胞、組織或機體全部蛋白質的存在及其活動方式。TMT技術是常用的差異蛋白質組學技術，比較不同樣品中差異表達的蛋白質，在疾病標記物篩選、藥物作用靶點等領域都有廣泛應用。PRM是一種基于高分辨、高精度質譜的離子監視技術，能夠對目標蛋白質、目標肽段進行選擇性檢測，從而實現對目標蛋白質/肽段進行絕對定量。

發明內容

本發明的首要目的在于提供一種預測兒童哮喘發作的組合試劑盒。

本發明的再一目的在于提供上述組合試劑盒在作為預測兒童哮喘發作的試劑中的應用。

本發明是這樣實現的，一種預測兒童哮喘發作的組合試劑盒，該組合試劑盒由若干分別用于檢測抗人α-1抗胰糜蛋白酶(AACT)、血清免疫球蛋白A(IgA)、血清淀粉樣蛋白A(SAA)、血紅蛋白(HBB)的子試劑盒構成。