[發明專利]鏈霉菌HL-66、其發酵產物、菌劑及用途

有效

• 申請號: 202110797798.7
• 申請日: 2021-07-14
• 公開（公告）號: CN113373093B
• 公開（公告）日: 2022-06-03
• 發明（設計）人: 韓立榮;孫宇波;吳皓;唐詩琪;谷麗花;田向榮
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學;渭南東旺農華生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C08B37/00;A01N63/28;A01P3/00;A01P1/00;C12R1/465
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 崔瑞迎

1.鏈霉菌（Streptomyces sp.）HL-66，其特征在于，該鏈霉菌保藏編號為：CGMCC No.22674。

2.權利要求1所述鏈霉菌HL-66的發酵產物，其特征在于，所述發酵產物為鏈霉多聚糖A，其制備方法包括以下步驟：

S1、將所述鏈霉菌HL-66的孢子接種于種子培養基，25-26℃培養3-5天，既得菌種；將菌種按接種量3%-9%接種于發酵培養基中發酵，28-30℃下培養5-6天，收集發酵液；

S2、發酵液經固液分離獲得上清液，上清液濃縮凍干，將凍干物加入水溶解，沸水提取3-5小時，過濾除雜，濃縮，加入4-20倍體積的無水乙醇，攪拌、沉淀過夜、抽濾，得到沉淀物；

S3、將沉淀物重新用水溶解，加入Sevag試劑，震蕩、靜置、離心、除蛋白，流水透析得粗多糖；

S4、使用DEAE Sepharose Fast Flow對粗多糖進行極性分離，調整流速為5mL/min，蒸餾水平衡2h；上清液上樣，通過全自動凝膠純化系統進行純化，結合示差檢測器在線檢測收集160-190min組分，得到鏈霉多聚糖A。

3.根據權利要求2所述鏈霉菌HL-66的發酵產物，其特征在于，每升的種子培養基中含有：酵母提取物3-5g，葡萄糖3-5g，K₂HPO₄ 3-5g，KH₂PO₄ 0.4-0.6 g，NaCl 0.9-1.1g，微量鹽溶液1-1.2mL，pH7.5。

4.根據權利要求3所述鏈霉菌HL-66的發酵產物，其特征在于，每升的發酵培養基中含有：葡萄糖20-22g，微量鹽溶液5-6mL，pH7.2-7.6。

5.根據權利要求4所述鏈霉菌HL-66的發酵產物，其特征在于，每升的微量鹽溶液中含有：CuCl₂ 0.0004-0.0005g ，FeSO₄ 0.0004-0.0005g，ZnCl₂ 0.0004-0.0005g，MnCl₂·4H₂O0.0004-0.0005g，CaCl₂ 0.0004-0.0005g。

6.以權利要求5所述鏈霉菌HL-66的發酵產物為有效成分的菌劑。

7.權利要求6所述菌劑在制備提高植物自身抗病性的產品中的用途。

8.根據權利要求7所述菌劑在制備提高植物自身抗病性的產品中的用途，其特征在于，所述抗病是指抗真菌病害和抗病毒性病害，真菌病害包括：番茄灰霉病、黃瓜枯萎病、馬鈴薯晚疫病、油菜菌核病、蘋果腐爛病、煙草赤星病和煙草黑脛病；病毒病害包括：煙草花葉病毒病、黃瓜花葉病毒病、番茄黃化曲葉病毒病和小麥黃矮病毒病。