[發明專利]蒿甲醚脂質體、紅細胞膜包脂質體、靶向肽修飾仿生脂質體及其制備方法和治療瘧疾的應用

有效

• 申請號: 202110795486.2
• 申請日: 2021-07-14
• 公開（公告）號: CN113521006B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發明（設計）人: 梁劍銘;何周清;茹麗;曾峰
• 申請（專利權）人: 廣州中醫藥大學（廣州中醫藥研究院）
• 主分類號: A61K47/64
• 分類號: A61K47/64;A61K47/46;A61K47/42;A61K31/357;A61K9/127;A61P33/06
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 馮潔

本發明涉及生物醫藥技術領域，具體而言，涉及蒿甲醚脂質體、紅細胞膜包脂質體、靶向肽修飾仿生脂質體及其制備方法和治療瘧疾的應用；本發明的蒿甲醚脂質體制備方法包括將蒿甲醚載入脂質體內，能夠提高蒿甲醚的水溶性，提高其抗瘧疾效果；本發明的紅細胞膜包脂質體的制備方法包括將紅細胞膜包裹于蒿甲醚脂質體表面，通過紅細胞膜表面的肝素樣受體俘獲血液游離的裂殖子，阻止裂殖子反復感染正常紅細胞，預防瘧疾周期性發作；本發明的靶向肽修飾仿生脂質體的制備方法包括在紅細胞膜包脂質體(仿生脂質體)表面修飾PS靶向肽，靶向遞送蒿甲醚至感染紅細胞，提高抗瘧疾效果。

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，具體而言，涉及蒿甲醚脂質體、紅細胞膜包脂質體、靶向肽修飾仿生脂質體及其制備方法和治療瘧疾的應用。

背景技術

瘧疾(malaria)是經按蚊叮咬傳播的急性傳染性疾病，是聯合國重點防控的三大傳染病之一。青蒿素類藥物是一線抗瘧藥物，其抗瘧機制主要是影響瘧原蟲表膜與線粒體的功能，阻斷瘧原蟲營養的供應。蒿甲醚作為青蒿素的主要衍生物之一，其化學性質相對穩定，抗瘧效果優于青蒿素，是一種諾華制藥抗瘧藥物-Coartem的主要成分。

然而，蒿甲醚存在生物利用度低，溶解性差，半衰期短等問題，極大限制了其臨床應用。而且，傳統蒿甲醚制劑缺乏靶向性，因此使用劑量相對較高，患者面臨心臟毒性、胚胎毒性及神經毒性等風險提高，新型納米靶向抗瘧制劑的研發顯得尤為關鍵。

發明內容

本發明的目的在于提供蒿甲醚脂質體、紅細胞膜包脂質體、靶向肽修飾仿生脂質體及其制備方法和治療瘧疾的應用。

本發明是這樣實現的：

第一方面，本發明提供一種蒿甲醚脂質體的制備方法，包括：

將蒿甲醚、蛋黃卵磷脂和膽固醇溶解于乙醇和二氯甲烷的混合溶液中，制成脂質溶液；

將脂質溶液加入PBS緩沖溶液中，攪拌，超聲處理，并將有機溶劑蒸發，制得脂質體；

將脂質體依次用200nm、100nm的聚碳酸酯膜來回擠壓。

在可選的實施方式中，將脂質溶液按照0.20-0.25mL/min的速率滴加入40-50℃的1×PBS的緩沖溶液中，與此同時，通過磁力攪拌器以700-800r/min的轉速攪拌，以200w、超聲處理5s，間歇停止5s的條件超聲處理8-12min，旋轉蒸發有機溶劑，制得脂質體。

第二方面，本發明提供一種蒿甲醚脂質體，其是由前述實施方式的蒿甲醚脂質體的制備方法制備的。

第三方面，本發明提供一種紅細胞膜包脂質體的制備方法，包括：

將紅細胞膜加入前述實施方式的蒿甲醚脂質體的溶液中，冰水浴超聲處理，將懸液用擠出方式依次擠出通過400nm、200nm的聚碳酸酯膜。

在可選的實施方式中，紅細胞膜的制備方法包括：在紅細胞溶液內加入含0.25mmol/L?EDTA的低滲溶液，劇烈渦旋后，添加PBS溶液至等滲，再次渦旋混勻；離心去上清液以濃縮；再添加純水，重懸，離心去上清液，洗滌紅細胞膜至白色。

第四方面，本發明提供一種紅細胞膜包脂質體，其是由前述實施方式的紅細胞膜包脂質體的制備方法制備的。

第五方面，本發明提供一種靶向肽修飾仿生脂質體的制備方法，包括：

向前述實施方式的紅細胞膜包脂質體的溶液中加入DSPE-PEG₂₀₀₀-PTP，冰水浴超聲處理，通過擠出方式依次擠出通過400nm、200nm聚碳酸酯膜。

在可選的實施方式中，DSPE-PEG₂₀₀₀-PTP的制備方法包括：固相合成多肽，并在N段加入半胱氨酸末端，再與DSPE-PEG₂₀₀₀-Mal進行偶聯。