[發明專利]一種人工胰腺及其構建方法

在審

• 申請號: 202110795355.4
• 申請日: 2021-07-14
• 公開（公告）號: CN113564099A
• 公開（公告）日: 2021-10-29
• 發明（設計）人: 李宸;周志敏;郭傳家;湯江海
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院生物醫學工程研究所
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 北京酷愛智慧知識產權代理有限公司 11514
• 代理人: 劉志剛

1.一種人工胰腺的構建方法，其特征在于，包括如下步驟：

(a)將功能細胞置于含有PLGA微球的培養基中進行培養，得到種植有功能細胞的PLGA微球，其中，功能細胞選自血管內皮細胞、神經細胞、淋巴管細胞以及可分化為血管內皮細胞、神經細胞或免疫細胞的干細胞中至少一種；

(b)將胰島細胞或可分化為胰島細胞的干細胞置于含有種植有功能細胞的PLGA微球的培養基中進行培養，得到所述人工胰腺。

2.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述步驟(a)中，PLGA微球的粒徑為50～500μm，孔徑為5～50μm。

3.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述步驟(a)中，功能細胞與PLGA微球的數量比為(10⁴～10⁷)∶1。

4.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述步驟(a)中，培養基為CMRL、DMEM、RPMI、MEM+10％胎牛血清、定制培養基或條件培養基；培養基中PLGA微球的濃度為100～5000個/mL；

培養溫度為0℃或37℃，培養時間為2～30天。

5.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述步驟(a)中，可分化為血管內皮細胞的干細胞為人臍帶血干細胞、內皮祖細胞、造血干細胞、骨髓干細胞、間充質干細胞、多能干細胞或胚胎干細胞；血管內皮細胞為原代血管內皮細胞或表達一種或多種含CD31、CD34、vWF、alpha-SMA、lectin、isolectin和VEGF血管標志物的血管內皮細胞；

可分化為神經細胞的干細胞為骨髓干細胞、內皮祖細胞、間充質干細胞、多能干細胞、胚胎干細胞或各組織中的神經干細胞；神經細胞為原代神經細胞或表達一種或多種含nestin、SOX2、neuronal marker class IIIβ-tubulin(TUJ1)、GFAP、NF200、Phox2b、ACh、PGP9.5和tyrosin hydroxylase神經細胞標志物的神經細胞；

可分化為免疫細胞的干細胞為造血干細胞或骨髓干細胞；免疫細胞為原代淋巴管細胞或表達LYVE-1淋巴管標志物的淋巴管細胞。

6.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述步驟(b)中胰島細胞或可分化為胰島細胞的干細胞與功能細胞的數量比為(1～5000)∶1。

7.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述步驟(b)中，胰島細胞為原代胰島細胞、MIN6、beta-TC-6、INS-1、NIT-1、胰島素分泌細胞、胰高血糖素分泌細胞、生長抑制素分泌細胞、胰島激素或多肽分泌細胞、胰腺祖細胞、alpha-TC細胞；可分化為胰島細胞的干細胞為間充質干細胞、多能干細胞、胚胎干細胞或骨髓干細胞。

8.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述步驟(b)中，培養溫度為0℃或37℃；培養時間為2～30天。

9.權利要求1～8任一所述的構建方法構建得到的人工胰腺。