[發明專利]抗菌肽GS18及其用途

在審

• 申請號: 202110794036.1
• 申請日: 2021-07-14
• 公開（公告）號: CN113461781A
• 公開（公告）日: 2021-10-01
• 發明（設計）人: 薛建鵬;徐寒梅;馬旭普;王鵬飛;謝廷智;張恩銘;梁煜彬;王冉;孫利廠;王瑱;杜南星
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;A61K38/10;A61P31/04
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 唐循文

本發明公開了一種抗菌肽，名為GS18，其序列為GLLRRLRKKIGEIFKKLS，SEQ ID NO:1。所述抗菌肽為人工設計合成的活性多肽，GS18包含18個氨基酸殘基，分子量為2155.74Da，等電點為11.74，凈電荷為+6。所述的抗菌肽的用途，用于制備治療革蘭氏陰性菌感染的抗菌藥物。本發明的抗菌肽GS18為α螺旋陽離子多肽，具有肽鏈長度較短、穩定性較好、人工合成方便、凈電荷高、殺菌作用強等優點。

技術領域

本發明屬于多肽領域，特別是涉及抗菌肽GS18及其應用。

背景技術

抗菌肽是廣泛存在于以自然界生物體中的一種多肽類物質，其來源十分廣泛，目前已在植物、昆蟲、兩棲類動物、哺乳動物、海洋生物、細菌、病毒等生物體中發現了1700多種抗菌肽。抗菌肽是重要的先天免疫分子，具有廣譜抗菌活性、破膜殺菌機制以及不易產生耐藥性等特點。同時，抗菌肽被認為是最具潛力的抗生素替代品，所以抗菌肽的研發將成為尋找抗生素替代品的重要突破口，并且抗菌肽在治療仔豬腹瀉方面的研究為抗菌肽在實際應用上提供了重要的參考價值。抗菌肽在抗菌活性方面有進一步改進的空間，同時其產生的細胞毒性也限制了其應用，因此這兩方面也是抗菌肽研究的熱點，而抗菌肽分子改良是該研究熱點較為常用的手段。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明要解決的技術問題是提供一種抗菌肽GS18及其用途。

一種抗菌肽，名為GS18，其序列為GLLRRLRKKIGEIFKKLS，如SEQ ID NO:1所示。

所述抗菌肽為人工設計合成的活性多肽，GS18包含18個氨基酸殘基，分子量為2155.7Da，等電點為11.74，凈電荷為+6。所述的抗菌肽的用途，用于制備治療革蘭氏陰性菌感染的抗菌藥物。

本發明的有益效果：

GS18含有7個正電荷氨基酸，7個疏水氨基酸，在CAMP數據庫中擬合顯示其具有α螺旋結構，GRAVY值為-0.400，高陽離子性低疏水性使其對革蘭氏陰性菌具有較好的靶向性。GS18在大腸桿菌體內的半衰期大于10小時。GS18可特異性與革蘭氏陰性菌結合，破壞細胞外膜，抵達內膜發揮殺菌作用。本發明的抗菌肽GS18具有肽鏈長度較短和毒性低等特點。

具體實施方式

實施例1微量肉湯稀釋法藥敏實驗

準備無菌的96孔細菌培養板，用微量移液槍吸取50LMHB液體培養基到第2～12排孔，第一排孔內加入100L適當濃度(如256μg/mL)的藥物母液，使用移液器從第一排吸取50L藥物溶液依次往后梯度稀釋，使2排-10排孔內的藥物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5g/mL。然后由低濃度往高濃度依次將50L稀釋好的待測菌液(終濃度5×105CFU/mL)加入2～11排溶液中，其中11排為菌液生長對照，12排為空白肉湯對照。操作結束后蓋上96孔板的蓋子，輕緩地水平搖晃均勻，放置37℃恒溫箱過夜培養16-20h，次日觀察MIC結果。

表1 抗菌肽GS18對四種細菌的MIC值