[發明專利]一種多重PCR體系快速檢測雞快慢羽表型的方法在審
| 申請號: | 202110793860.5 | 申請日: | 2021-07-14 |
| 公開(公告)號: | CN113699245A | 公開(公告)日: | 2021-11-26 |
| 發明(設計)人: | 陳思睿;呂慧嬌;屈元啟;張康寧;翟尚昆;王濤 | 申請(專利權)人: | 中國農業大學 |
| 主分類號: | C12Q1/6888 | 分類號: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人: | 陳波 |
| 地址: | 100193 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 多重 pcr 體系 快速 檢測 快慢 表型 方法 | ||
1.一種雞快慢羽表型的分子鑒定方法,其特征在于,使用針對PRLR基因和SPEF2基因設計的引物組進行擴增。
2.根據權利要求1所述的方法,其中所述引物組中的引物序列為引物K-R1:SEQ IDNO.1;引物K-F1:SEQ ID NO.2;引物K-R2:SEQ ID NO.3。
3.根據權利要求1或2所述的方法,其中所述方法包括DNA提取的步驟。
4.根據權利要求1-3任一項所述的方法,其中所述方法包括以瓊脂糖凝膠電泳檢測的步驟。
5.根據權利要求4所述的方法,其中瓊脂糖凝膠電泳檢測中快羽個體只有一條帶,長度為445bp;慢羽個體有兩條帶,長度分別為235bp和445bp;引物對K-F1和K-R1擴出445bp的條帶,而引物對K-F1和K-R2擴出235bp的條帶。
6.根據權利要求1-5任一項所述的方法,其中擴增的反應體系為:2×PCR Mix 7.5μL、ddH2O 5.6μL、引物K-F1 0.3μL、引物K-R1 0.3μL、引物K-R2 0.3μL、DNA模板1μL。
7.根據權利要求1-6任一項所述的方法,其中擴增的反應程序為:①95℃5min,②95℃30sec,③60℃30sec,④72℃30sec,⑤Go to②for 35cycles,⑥72℃10min,⑦4℃保存。
8.根據權利要求1-7任一項所述的方法在雞雌雄鑒定中的應用。
9.根據權利要求1-7任一項所述的方法在雞育種中的應用。
10.一種雞快慢羽表型的PCR鑒定試劑盒,其特征在于包含以下引物:引物K-R1:SEQ IDNO.1;引物K-F1:SEQ ID NO.2;引物K-R2:SEQ ID NO.3。
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