[發明專利]一種miR-674-3p在制備預防或治療應激性高血壓藥物中的應用

有效

• 申請號: 202110789623.1
• 申請日: 2021-07-13
• 公開（公告）號: CN113384595B
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 張帥;陳高俊;邢孟愉;杜東書;杜羽
• 申請（專利權）人: 浙江中醫藥大學
• 主分類號: A61K31/7088
• 分類號: A61K31/7088;A61P9/12
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

本發明公開了一種miR?674?3p在制備預防或治療應激性高血壓藥物中的應用，本發明揭示了抑制miR?674?3p表達能有效降低應激性高血壓大鼠心率、腎交感神經活動、平均動脈壓、收縮壓以及舒張壓。miR?674?3p可以作為應激性高血壓治療的新分子靶點，指導相關藥物的篩選和研發。

(一)技術領域

本發明涉及一種miR-674-3p在制備預防或治療應激性高血壓藥物中的應用。

(二)背景技術

隨著社會經濟的迅猛發展，生活節奏不斷加快、工作壓力日益增大，各種激烈競爭使得人們精神情緒持續緊張、應激加劇，導致高血壓發生，這種高血壓稱之為應激性高血壓。應激性高血壓是腦卒中、冠心癥等疾病的重要危險因素，其發病率逐年遞增，呈年輕化趨勢，危害極大。延髓頭端腹外側區是心血管活動調節的關鍵中樞核團之一，在應激性高血壓中發揮重要調控作用。應激導致延髓頭端腹外側區一系列基因表達與調控的變化，引起交感神經興奮，使血壓升高。因此，探究參與延髓頭端腹外側區基因表達調控的內源性分子，現實意義較大，它們是治療應激性高血壓的重要靶點。

miRNA是一類高度保守長約17到25個核苷酸的內源性非編碼小RNA分子，廣泛分布于真核生物中，主要在轉錄后水平對基因的表達進行調控，在細胞分化、個體發育以及疾病發生發展過程中扮演重要角色。目前關于miRNA調控與應激性高血壓關系研究十分有限，未見延髓頭端腹外側區miR-674-3p在調控應激性高血壓方面作用的報道。

(三)發明內容

本發明目的是提供一種miR-674-3p在制備預防或治療應激性高血壓藥物中的應用，對應激性高血壓的臨床預防或治療意義重大。

本發明采用的技術方案是：

本發明提供一種miR-674-3p在制備預防或治療應激性高血壓藥物中的應用。

所述miR-674-3p為miRNA，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述miR-674-3p核苷酸序列：5’-CACAGCUCCCAUCUCAGAAC-3’。

所述藥物為下列之一：降低應激性高血壓心率的藥物，降低應激性高血壓腎交感神經活動的藥物，降低應激性高血壓平均動脈壓、收縮壓或舒張壓的藥物。

所述的應用為抑制miR-674-3p的表達，用于抑制miR-674-3p表達的抑制劑(即miR-674-3p antagomir)為單鏈RNA，核苷酸序列為5’-GUUCUGAGAUGGGAGCUG UG-3’(SEQ IDNO.8)。

本發明利用miR-674-3p調控應激性高血壓的方法為：

第一，應激性高血壓大鼠模型的建立。

第二，對各具有3個生物學重復的應激性高血壓大鼠和正常對照大鼠的延髓頭端腹外側區組織進行miRNA-seq測序，根據差異表達分析結果中的P值，篩選出P0.05的miRNAs，結果顯示miR-674-3p在應激性高血壓大鼠延髓頭端腹外側區呈顯著高表達。

第三，設計miR-674-3p和內參U6的qPCR定量引物，通過qPCR進一步檢測了miR-674-3p在應激性高血壓大鼠和正常對照大鼠延髓頭端腹外側區的表達情況，結果顯示其在應激性高血壓大鼠延髓頭端腹外側區呈顯著高表達，與miRNA-seq結果一致。

第四，合成miR-674-3p抑制劑(即miR-674-3p antagomir)和陰性對照(即NCantagomir)在應激性高血壓大鼠延髓頭端腹外側區進行雙側注射，結果顯示抑制miR-674-3p的表達可以顯著降低應激性高血壓大鼠心率、腎交感神經活動、平均動脈壓、收縮壓以及舒張壓。