[發(fā)明專利]CD138抗體聯(lián)合Mum1抗體在檢測(cè)漿細(xì)胞中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110788943.5
• 申請(qǐng)日: 2021-07-13
• 公開（公告）號(hào): CN113514645A
• 公開（公告）日: 2021-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 江慶萍;熊中堂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院(廣州重癥孕產(chǎn)婦救治中心;廣州柔濟(jì)醫(yī)院)
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 安衛(wèi)靜

本發(fā)明公開了CD138抗體聯(lián)合Mum1抗體在檢測(cè)子宮內(nèi)膜中漿細(xì)胞的應(yīng)用，涉及醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)。本發(fā)明公開CD138抗體聯(lián)合Mum1抗體用于免疫組化檢測(cè)子宮內(nèi)膜中漿細(xì)胞的的應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)對(duì)漿細(xì)胞的準(zhǔn)確標(biāo)記和識(shí)別，提高以漿細(xì)胞為標(biāo)志物的慢性子宮內(nèi)膜炎診斷或輔助診斷的準(zhǔn)確率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及CD138抗體聯(lián)合Mum1抗體在檢測(cè)漿細(xì)胞中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

慢性子宮內(nèi)膜炎(Chronic endometritis，CE)是一種持續(xù)而輕微的炎癥，其特征是漿細(xì)胞浸潤在子宮內(nèi)膜間質(zhì)區(qū)。從流行病學(xué)上，慢性子宮內(nèi)膜炎與IUD、分娩史、多胎和非典型子宮出血等因素有關(guān)。CE病因尚不明確，有學(xué)者認(rèn)為宮腔內(nèi)病原微生物與子宮內(nèi)膜免疫細(xì)胞相互作用是導(dǎo)致CE的主要原因。傳統(tǒng)上，CE的臨床意義在臨床實(shí)踐中并未受到關(guān)注，因?yàn)樗ǔＪ菬o癥狀的或僅表現(xiàn)出細(xì)微的癥狀，例如子宮異常出血，骨盆疼痛，性交困難和白帶增多等。但是最近的研究表明，CE對(duì)女性生育能力有不利影響，與女性不孕癥密切相關(guān)，例如CE增加了IVF后反復(fù)種植失敗(RIF)、不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)等，這使CE的診斷在不孕癥中成了越來越重要一個(gè)病因。CE的診斷主要依靠病理醫(yī)生對(duì)子宮內(nèi)膜刮宮或活檢標(biāo)本的鏡下判斷來完成。但目前存在兩大瓶頸：1.如何準(zhǔn)確識(shí)別CE的必要元素漿細(xì)胞。2.多少數(shù)量漿細(xì)胞能判斷為CE。在臨床實(shí)際工作中，病理醫(yī)師單純通過HE形態(tài)來檢測(cè)子宮內(nèi)膜活檢標(biāo)本中漿細(xì)胞，容易漏診或者誤診，并且診斷CE一致性不好。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供CD138抗體聯(lián)合Mum1抗體在檢測(cè)漿細(xì)胞中的應(yīng)用。本發(fā)明提供將CD138抗體和Mum1抗體聯(lián)合通過免疫組化雙染色用于對(duì)漿細(xì)胞的染色，實(shí)現(xiàn)對(duì)漿細(xì)胞的準(zhǔn)確標(biāo)記和識(shí)別，提高以漿細(xì)胞為標(biāo)志物的相關(guān)疾病包括慢性子宮內(nèi)膜炎的診斷或輔助診斷的準(zhǔn)確率。

本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的：

病理學(xué)診斷技術(shù)發(fā)展至今，已進(jìn)入到傳統(tǒng)解剖、組織形態(tài)學(xué)、免疫組化以及原位雜交等分子技術(shù)相互補(bǔ)充、綜合應(yīng)用的新階段。免疫組化技術(shù)在我國開展已有三十多年，發(fā)揮著承前啟后的重要作用，隨著技術(shù)方法的不斷充實(shí)和改進(jìn)，新技術(shù)也逐漸增加。免疫組化單一染色方法由于提供組織信息有限，且著色在2張或多張切片上，位置分離，加大了病理醫(yī)師對(duì)結(jié)果判讀的難度。雙染技術(shù)可以彌補(bǔ)單一染色的不足，該技術(shù)可在同一切片上同時(shí)或先后進(jìn)行兩種不同染色，如免疫組化雙染、免疫組化與特殊染色、免疫組化與原位雜交等。

免疫組化雙重染色技術(shù)是利用免疫組化方法在同一張組織切片上同時(shí)顯示兩種或者兩種以上的抗原，以發(fā)現(xiàn)其定位，形態(tài)和功能上的相互關(guān)系。它是一項(xiàng)多環(huán)節(jié)、受多因素影響的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，該技術(shù)可以了解同一細(xì)胞內(nèi)抗原之間的相互關(guān)系、不同細(xì)胞、組織與相關(guān)抗原的相互關(guān)系以及相關(guān)抗原在細(xì)胞中的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝情況；免疫組化雙染技術(shù)可將形態(tài)觀察與功能分析結(jié)合起來；其原理是利用抗原和抗體之間特異性的結(jié)合以及特殊的標(biāo)記技術(shù)，對(duì)細(xì)胞和組織內(nèi)的特定抗原定性、定位檢測(cè)。

CD138是識(shí)別漿細(xì)胞比較特異的蛋白分子，其主要定位于細(xì)胞膜上，但偶而也會(huì)在上皮細(xì)胞，NK細(xì)胞和T細(xì)胞亞型中出現(xiàn)陽性表達(dá)。子宮內(nèi)膜腺體和間質(zhì)中偶爾出現(xiàn)著色現(xiàn)象，特異性效果并不理想。非漿細(xì)胞染色的出現(xiàn)，給病理工作者對(duì)漿細(xì)胞的識(shí)別以及隨后的臨床診斷和治療帶來一定誤差。因此，如何更加準(zhǔn)確地在豐富的子宮內(nèi)膜腺體和間質(zhì)細(xì)胞中判斷漿細(xì)胞，給本領(lǐng)域帶來了嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。

Mum1，也稱為干擾素調(diào)節(jié)因子4，是由位于人類6號(hào)染色體上IRF4基因所編碼的一種轉(zhuǎn)錄因子。Mum1/IRF4是影響淋巴細(xì)胞活化形成具有抗原活性和分泌Ig漿細(xì)胞的必要因子，其主要定位于細(xì)胞核。

本發(fā)明首次提出應(yīng)用CD138抗體聯(lián)合和MUM1抗體免疫組化雙染技術(shù)用于漿細(xì)胞的標(biāo)記和識(shí)別，結(jié)果顯示通過對(duì)CD138和MUM1兩個(gè)分子的染色，可以更加準(zhǔn)確地、快速地標(biāo)記漿細(xì)胞，從而更加精準(zhǔn)的診斷以漿細(xì)胞為主要標(biāo)志物的疾病例如慢性子宮內(nèi)膜炎。