[發明專利]一種硒多糖及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110788132.5
• 申請日: 2021-07-13
• 公開（公告）號: CN113368127B
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 畢宏濤;高婷婷;魏立新;李國強;張明
• 申請（專利權）人: 中國科學院西北高原生物研究所
• 主分類號: A61K33/04
• 分類號: A61K33/04;A61K31/732;A61P11/00;C08B37/06
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 趙琪

1.一種硒多糖，其特征在于，包括果膠類多糖和負載在所述果膠類多糖上的硒單質；

所述的硒多糖按照以下步驟制備得到：

(1)將蘋果的成熟果實加水經微波-超聲波協同提取，得到提取液，所述提取液經10000rpm離心10min去除沉淀，收集上清液A；所述上清液A在溫度為60℃的條件下濃縮至原體積的20％后，得到濃縮液，所述濃縮液用其質量4倍且體積濃度為100％的乙醇沉淀得到多糖沉淀；所述多糖沉淀在真空度10Pa、溫度為-70℃的條件下冷凍干燥72h，得蘋果多糖；其中，微波-超聲波協同提取條件是指料液質量比為1：15，微波功率為340W，超聲波功率為800W，提取總時間為25min，溫度為90℃；

(2)將所述蘋果多糖按其質量的20倍加水復溶，經10000rpm離心10min去除沉淀，得到上清液B，所述上清液B經DEAE-纖維素層析柱層析后，依次用3倍柱體積的蒸餾水和0.5mol/LNaCl水溶液洗脫，并根據糖含量分布曲線收集0.5mol/LNaCl水溶液的洗脫液A；所述洗脫液A經截留分子量為3500Da的透析袋在蒸餾水中透析48h，然后在真空度10Pa、溫度為-70℃的條件下冷凍干燥72h，得到蘋果酸性多糖；其中，DEAE-纖維素層析柱層析的條件是指色譜柱直徑10cm、長度50cm，流動相依次為蒸餾水和0.5mol/LNaCl，流速為20cm/h；

(3)將所述蘋果酸性多糖按其質量的5～10倍加水溶解后，用Sepharose?CL-6B層析柱純化，并根據糖含量分布曲線收集4.4～180.7kDa分子量范圍的洗脫液B；所述洗脫液B經截留分子量為3500Da的透析袋在蒸餾水中透析48h，然后在真空度10Pa、溫度為-70℃的條件下冷凍干燥72h，得到蘋果HG果膠型膳食纖維；其中，SepharoseCL-6B層析柱純化條件是指色譜柱直徑1cm、長度80cm，流動相為0.05mol/LNaCl水溶液，流速為10cm/h；所述蘋果HG果膠型膳食纖維的總糖質量百分含量97.5％，半乳糖醛酸質量百分含量95.3％，蛋白質質量百分含量0.1％，糖殘基的構型和糖苷鍵主要為→1)-β-D-GalpA-(4→；

(4)按照料液比1g：1L，向所述蘋果HG果膠型膳食纖維中加入去離子水，500rpm條件下攪拌30min，得到果膠類多糖溶液；

(5)向果膠類多糖水溶液中加入SeO₂粉末，邊加邊在1000rpm條件下攪拌，室溫充分溶解，使溶液中SeO₂濃度達到10mM；

(6)向溶液中加入維生素C粉末，邊加邊在1000rpm條件下攪拌，室溫充分溶解，使溶液中維生素C濃度達到50mM，待反應溶液中出現的紅色不再加深，停止攪拌；

(7)反應溶液裝入材質為纖維素酯膜、截留分子量為10000Da的透析袋，流水透析48h，隨后蒸餾水透析24h；

(8)透析袋內溶液濃縮至原體積的1/10，在真空度5.5Pa、冷阱溫度-73.5℃條件下冷凍干燥，得到硒多糖。