[發(fā)明專利]GhMYB44基因在棉花愈傷組織分化發(fā)育中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110773050.3
• 申請日: 2021-07-08
• 公開（公告）號(hào): CN113528534B
• 公開（公告）日: 2023-01-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王曄;陳全家;葛曉陽;劉理森
• 申請（專利權(quán)）人: 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所
• 主分類號(hào): C12N15/29
• 分類號(hào): C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/60
• 代理公司: 北京慕達(dá)星云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 崔自京

本發(fā)明公開了GhMYB44基因在棉花愈傷組織分化發(fā)育中的應(yīng)用，屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)領(lǐng)域。本申請通過超表達(dá)GhMYB44基因，使中棉所24植株外植體7d形成層中細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生了重組、30d愈傷組織的細(xì)胞呈現(xiàn)小而圓的特征、45d愈傷組織的有類似胚性愈傷組織細(xì)胞團(tuán)出現(xiàn)，這些表型說明該基因能夠促進(jìn)受體材料更快從愈傷組織分化為胚性愈傷組織，加快再生苗進(jìn)程，從外植體得到再生苗時(shí)間僅需182d，比對照縮短了24.7％，為棉花基因轉(zhuǎn)化和快速育種做出貢獻(xiàn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于轉(zhuǎn)基因技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種GhMYB44基因在棉花遺傳轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

棉花是世界上最主要的經(jīng)濟(jì)作物之一，其纖維是紡織工業(yè)的重要原料，種子是重要的油料來源，棉花紡織加工業(yè)和種植業(yè)是國民經(jīng)濟(jì)的重要組成部分。目前我國棉花品種的綜合競爭力弱，在纖維品質(zhì)，產(chǎn)量，抗病，耐旱及耐鹽堿等方面亟需提高，培育出具有競爭力的新品種迫在眉睫，利用基因工程改良棉花品種是快速有效的途徑。但現(xiàn)有的轉(zhuǎn)基因體系，存在著轉(zhuǎn)化周期長、體細(xì)胞胚畸形率高和正常再生苗數(shù)量少等問題，嚴(yán)重限制了基因工程在棉花品種改良中的應(yīng)用。

為解決這個(gè)瓶頸問題，我們需要解析調(diào)控棉花體細(xì)胞胚胎發(fā)生的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，篩選改良棉花遺傳轉(zhuǎn)化體系的關(guān)鍵基因，優(yōu)化棉花體細(xì)胞胚胎發(fā)生體系，為高效創(chuàng)制棉花新品種奠定基礎(chǔ)。

因此，如何提供一種可加快棉花愈傷組織分化發(fā)育的基因是本領(lǐng)域亟待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了GhMYB44基因在棉花胚性愈傷組織分化發(fā)育中的應(yīng)用。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

GhMYB44基因在加快棉花愈傷組織分化發(fā)育中的應(yīng)用；所述GhMYB44基因序列如SEQ ID NO.1所示；

GhMYB44蛋白在加快棉花愈傷組織分化發(fā)育中的應(yīng)用；所述GhMYB44蛋白序列如SEQ ID NO.2所示；

一種GhMYB44基因超表達(dá)棉花植株的愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基，包括：含有0. 5mol/L2,4-D和0.5mol/L KT的MSB培養(yǎng)基；

一種GhMYB44基因超表達(dá)棉花植株的胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基，包括：含有0.5mol/L KT的MSB培養(yǎng)基；

一種GhMYB44基因超表達(dá)棉花植株的組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

(1)取棉花幼苗下胚軸，置于權(quán)利要求3所述的愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，適宜條件下，培養(yǎng)30-40天；

(2)待長出愈傷組織后，將愈傷組織轉(zhuǎn)移至權(quán)利要求4所述的胚性愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)，得胚性愈傷組織。

優(yōu)選的，步驟(1)和步驟(2)中，所述適宜條件為：28±2℃，光照強(qiáng)度 2000Lx，光照周期16h/8h；

優(yōu)選的，步驟(1)中，培養(yǎng)周期為30天；

還包括以下步驟：

(3)將胚性愈傷組織繼代到胚狀體誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行胚狀體誘導(dǎo)，得胚狀體；

還包括以下步驟：

(4)將胚狀體繼代到成苗培養(yǎng)基中培養(yǎng)得轉(zhuǎn)基因幼苗；

還包括以下步驟：

(5)將轉(zhuǎn)基因幼苗繼代到生根培養(yǎng)基，長出白根后煉苗，移栽溫室；

所述棉花品種為中棉所24；