[發明專利]一種同時檢測舒肝和胃止痛中藥四種成分含量的方法

有效

• 申請號: 202110769856.5
• 申請日: 2021-07-07
• 公開（公告）號: CN113533563B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 熊莉;黃志軍;熊登科;李慧;曾慶恢;王偉婷;楊頏;曾添;吳木琴;張書穎
• 申請（專利權）人: 健民藥業集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 武漢智嘉聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 42231
• 代理人: 徐紹新

本發明公開了一種同時檢測舒肝和胃止痛中藥四種成分含量的方法，所述舒肝和胃止痛中藥由枳殼、紫蘇梗、虎杖、陳皮、香附、黃連、吳茱萸、浙貝母、海螵蛸、甘草共十味藥材制成，所述四種成分為虎杖苷、柚皮苷﹑橙皮苷和新橙皮苷。本發明在前期HPLC指紋圖譜方法的基礎上進行改進，不僅成功建立了四種成分含量的檢測方法，而且還克服了現有方法色譜峰分離度低、峰面積小等缺點，提高了含量測定的準確性和靈敏度。

技術領域

本發明屬于藥物分析領域，具體涉及一種同時檢測舒肝和胃止痛中藥中四種成分含量的方法。

背景技術

舒肝和胃止痛中藥為健民藥業研發的中藥復方新藥，其處方由枳殼、紫蘇梗、虎杖、陳皮、香附、黃連、吳茱萸、浙貝母、海螵蛸、甘草十味藥材組成，CN105770376A的專利文獻已公開了本品的處方。該中藥依據傳統中醫理論并結合現代制藥工藝研制而成，具有舒肝和胃止痛的功效，用于非糜爛性胃食管返流病肝胃不和證，癥見燒心，胸骨后疼痛，噯氣、嘈雜、胃痛或胃脹、胸脅脹滿或脹痛等，目前正在開展臨床前藥學研究。

當前，對大多數中藥的質量控制仍主要通過薄層鑒別、浸出物測定、一兩種成分的含量測定來實現，但由于中藥成分復雜，而且是由多成分多靶點共同作用產生療效，藥材的品質和生產環節都會對中藥的質量產生重要影響，而上述這些質量分析方法都不能相對全面地控制產品質量，無法保證藥品質量的一致性，導致中藥摻假、偽劣現象頻發，嚴重影響了患者的用藥安全。

另外，現有的質控方法往往需要制備不同的檢測樣品和使用不同的儀器，存在檢測周期長，費用高等缺點。相比之下，指紋圖譜能通過對檢測樣品只進行一次色譜分離就能實現對中藥主要成分的檢測，尤其是針對藥材來源廣、成分復雜、物質基礎不明確的中藥復方，指紋圖譜可實現對中藥內在成分的綜合評價和對其整體質量的有效控制，是目前中藥及其制劑質量評價的最有效手段之一。

為此，申請人前期針對該中藥新藥建立了一種HPLC指紋圖譜檢測方法，該方法已于2020年9月27日申請了一項中國發明專利，申請號202011034779.0。該方法建立的指紋圖譜包含13個指紋峰，分別歸屬于中藥里的九味藥材，其中還指認了五種成分峰，分別為虎杖苷、柚皮苷﹑橙皮苷﹑新橙皮苷、大黃素。

但是，指紋圖譜方法主要依據化學成分的出峰時間對中藥進行定性檢測，從而判斷成分的有無，而不能很好地對化學成分進行定量檢測，因此藥材質量以及生產工藝的一致性仍無法得到充分保障。

如果能建立起中藥多種化學成分的含量測定方法，并將該方法與中藥指紋圖譜相結合，從而對中藥成分同時進行定性和定量，將更有利實現中藥全方位、可溯源、與臨床療效高度關聯的全程質量控制體系。

發明內容

本發明的目的是針對上述問題，建立一種同時檢測舒肝和胃止痛中藥多種成分含量的方法，該方法能對中藥四種化學成分同時進行定量檢測，從而能更好地用于控制產品質量。

為實現上述目的，本發明采用如下技術手段：

一種同時檢測舒肝和胃止痛中藥四種成分含量的方法，所述舒肝和胃止痛中藥由枳殼、紫蘇梗、虎杖、陳皮、香附、黃連、吳茱萸、浙貝母、海螵蛸、甘草共十味藥材制成，所述四種成分為虎杖苷、柚皮苷﹑橙皮苷和新橙皮苷，所述檢測方法包括將待測樣品用正丁醇提取并過聚酰胺柱純化后上高效液相色譜儀進行檢測的步驟，所述高效液相色譜儀含有紫外檢測器，所述紫外檢測器的設定檢測波長為200-350nm，所述高效液相色譜儀的固定相為C₁₈色譜柱，流動相A為乙腈，流動相B為0.1％(體積)磷酸水溶液，采用梯度洗脫，流速為0.5-2ml/min，柱溫為25-40℃。

優選地，所述正丁醇提取是用水飽和正丁醇超聲提取。

優選地，所述聚酰胺柱的填料粒徑為60～90目。

所述過聚酰胺柱純化的具體方法是：將正丁醇提取物用乙醇溶解后上聚酰胺柱，依次用水、50％(體積)乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液。