[發明專利]一種檢測耳聾基因21位點的試劑盒

有效

• 申請號: 202110767870.1
• 申請日: 2021-07-07
• 公開（公告）號: CN113481291B
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發明（設計）人: 余艷;陳鵬;譚兵健;代冰;唐春燕;葛虎
• 申請（專利權）人: 長沙金域醫學檢驗實驗室有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858
• 代理公司: 長沙優企知識產權代理事務所(普通合伙) 43243
• 代理人: 周棟

本發明公開了一種檢測耳聾基因21位點的試劑盒。所述試劑盒能同時檢測耳聾基因的如下位點：檢測GJB2基因c.35delG，c.176_191del16，c.235delC，c.299_300delAT，c.167delT，c.508_511dupAACG；GJB3基因c.538CT，c.547GA；MITO?12SrDNA基因m.1555AG，m.1494CT；SLC26A4基因外顯子9 c.1174AT，c.1226GA，c.1229CT；SLC26A4基因外顯子2 c.281CT；SLC26A4基因外顯子14c.1707+5GA；SLC26A4基因外顯子16 c.1975GC，c.2027TA；SLC26A4基因外顯子18 c.2162CT，c.2168AG；SLC26A4基因外顯子4 c.589GA；SLC26A4基因外顯子6/7 c.919?2AG共21個位點。

技術領域

本發明屬于生物醫學檢測技術領域，具體涉及一種檢測耳聾相關基因的試劑盒。

背景技術

耳聾為最常見的出生缺陷之一，致病原因分為遺傳和多種環境因素，其中至少有50％學語前耳聾是由遺傳因素導致的。遺傳性耳聾是指來自父母的遺傳物質傳遞給后代引起聽力下降，父母至少有一方為耳聾基因攜帶者。均攜帶隱性遺傳耳聾基因的父母，再生育聾兒的風險為25％，顯性遺傳耳聾再生育則具有50％的風險。我國每年出生聾兒約3萬，約有30萬對生有一個聾兒的育齡夫婦面臨再次生育另一個聾兒的風險，而且生育了一胎先天性聾兒的夫婦本身就是生育聾兒高危夫婦，他們迫切需要知道發生耳聾的準確病因并需要相應的產前診斷技術來確保再次生育成功。耳聾基因診斷則可以在60％左右的育有遺傳性耳聾患兒夫婦再生育計劃中發揮作用，保證第二胎不具有導致耳聾的同樣缺陷基因，為計劃生育和優生優育政策提供確實的技術保障和支持。

目前應用于臨床的耳聾基因常規檢測項目主要有線粒體12rsRNA基因、GJB2基因、GJB3基因、SLC26A4基因。耳聾基因篩查對先天性或遺傳性耳聾的診斷具有一定參考價值。線粒體12rsRNA基因突變與氨基糖甙類藥物引起耳聾有關；GJB2基因被認為我國最常見的致聾基因，患兒GJB2基因陽性，應考慮先天性或遺傳性耳聾的可能性；SLC26A4基因突變可以導致大前庭水管綜合征；GJB3基因的538CT為目前已知可誘發耳聾的致病基因。GJB3基因的538CT純合突變，提示目前已經耳聾或以后發生耳聾的幾率非常大；而GJB3基因的538CT雜合突變，提示以后可能發生耳聾或不發生耳聾的可能性均存在，因此需要長時期聽力監測。

臨床上針對遺傳性耳聾的檢測方法，多以測序為主，其中包含特異性高但是通量小的Sanger測序法，以及通量大但是費用高昂的二代測序。Snapshot技術是一種基于熒光標記單堿基延伸原理的SNP分型技術，具有高特異性、操作簡單、經濟以及較高通量的特點。Snapshot技術的難點在于針對檢測位點的引物設計，需要考慮引物的結構、長度、Tm值、在反應體系中的比例平衡等多個因素。實驗方法的完善需要經過大量的測試及優化調整，如何平衡設計引物，使得一次實驗反應能更好的檢測更多的位點，節約時間與經濟成本，便是此技術的關鍵所在。

發明內容

本發明旨在克服現有技術中的不足，提供一種檢測耳聾基因21位點的試劑盒。

為了達到上述目的，本發明提供的技術方案為：

所述檢測耳聾基因21位點的試劑盒可以同時檢測如下位點：