[發明專利]EGFR基因L858R突變檢測的引物探針、試劑盒及其應用有效
| 申請號： | 202110765704.8 | 申請日： | 2021-07-07 |
| 公開（公告）號： | CN113355423B | 公開（公告）日： | 2022-06-07 |
| 發明（設計）人： | 劉國東;董濤;沈兵;邱萬偉;錢立生;張學記 | 申請（專利權）人： | 安徽科技學院 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 李博 |
| 地址： | 233100 *** | 國省代碼： | 安徽;34 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | egfr 基因 l858r 突變 檢測 引物 探針 試劑盒 及其 應用 | ||
1.EGFR基因L858R突變檢測的引物探針，其特征在于，所述L858R突變的上游引物序列如SEQ ID NO:1所示；所述L858R突變的下游引物序列如SEQ ID NO:2所示；所述L858R突變的探針為金標探針，其序列如SEQ ID NO:3所示。
2.根據權利要求1所述的引物探針，其特征在于，所述金標探針序列3’端修飾18~20nm膠體金。
3.權利要求1或2所述引物探針用于制備檢測EGFR基因L858R突變試劑中的應用。
4.一種檢測EGFR基因L858R突變的試劑盒，其特征在于，包括權利要求1或2所述的引物以及側流層析試紙條，所述試紙條上的結合墊噴涂有權利要求1所述探針。
5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還包括RPA擴增試劑。
6.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還包括側流層析緩沖溶液，所述緩沖溶液包括5x SSC、2%BSA和2%PVP，所述的5x SSC為pH7.0的4.4%氯化鈉和2.2%檸檬酸鈉溶液。
7.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述引物的濃度為4μM，所述金標探針的濃度為15nM。
8.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試紙條的檢測線劃有鏈霉親和素，質控線上劃有生物素修飾的質控探針，所述質控探針序列如SEQ ID NO:4所示。
9.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試紙條上的樣品墊用處理緩沖液浸泡處理，所述的處理緩沖液包括0.05 M Tris-HCl、0.15 mM NaCl、0.25％Triton X-100和2.5% Tween-20。
10.一種非診斷目的的根據權利要求1或2所述的引物探針或權利要求4~9任意一項所述試劑盒檢測EGFR基因L858R突變的方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）提取待測血液樣本的ctDNA；
（2）用所述引物以ctDNA為模板進行RPA擴增，RPA擴增反應的條件為：37℃水浴30min；
（3）采用側流層析試紙條進行擴增產物檢測。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于安徽科技學院，未經安徽科技學院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202110765704.8/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：一種藍牙通信模塊系統
- 下一篇：一種交互方法、裝置、系統及存儲介質
