[發(fā)明專利]一種茯苓菌種培養(yǎng)基的制備方法

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• 申請日: 2021-07-07
• 公開（公告）號: CN113383676A
• 公開（公告）日: 2021-09-14
• 發(fā)明（設計）人: 岳紅城
• 申請（專利權）人: 云茯苓普洱有限公司
• 主分類號: A01G18/20
• 分類號: A01G18/20;A01G18/40
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種茯苓菌種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、原料的備用：馬鈴薯150-200份、胡蘿卜50-80份、瓊脂粉20-30份、葡萄糖20-22份、磷酸二氫鉀1-3份、玉米面5-12份、小麥10-20份、麥麩5-8份、谷糠2-6份、石膏0.5-4份、紅糖0.5-1份、松鋸末50-70份以及水100-200份。

S2、制備母種培養(yǎng)基：將步驟S1中的馬鈴薯、胡蘿卜加水進行煎煮操作，得到所需的煎煮液，將煎煮液進行過濾處理，并向過濾后的濾液中加入瓊脂粉30份、葡萄糖20份以及磷酸二氫鉀，混合均勻，加水定容至1升，備用；

S3、制備斜面培養(yǎng)基：將步驟S2中制備的母種培養(yǎng)基分裝到試管的內部，滅菌處理，使其成斜面培養(yǎng)基；

S4、制備母種菌絲：將培養(yǎng)基先進行進行消毒處理，然后將茯苓菌核內一塊白色茯苓肉接入到步驟S3中的斜面培養(yǎng)基中，移入20-30℃的室內培養(yǎng)5-7天，檢查菌絲的生長，待菌絲布滿斜面，得到所需的母種菌絲；

S5、制備原種培養(yǎng)基：將玉米面9份、小麥20份、麥麩8份、谷糠2份、石膏0.5份、紅糖0.5份以及松鋸末60份加水至含水量50份、制備原種培養(yǎng)基進行備用，將原種培養(yǎng)基分裝在廣口瓶中，進行滅菌冷卻處理；

S6、制備原種茯苓菌種：從步驟S4中制備的母種菌絲放入步驟S5中的廣口瓶原種培養(yǎng)基中央，28℃恒溫培養(yǎng)25-28天，菌絲長滿全瓶，即為原種茯苓菌種；

S7、制備生產種培養(yǎng)基：將玉米面5份、小麥8份、玉米10份、麥麩5份、谷糠1份、石膏0.5份、紅糖0.5份以及松鋸末70份，加水至含水量40-50份，制備生產種培養(yǎng)基，將生產種培養(yǎng)基分裝在廣口瓶中，進行滅菌冷卻處理；

S8、制備生產種茯苓菌種：從步驟S4中制備的母種菌絲放入步驟S7中的聚丙烯包裝袋生產中培養(yǎng)基的中央，28℃置于恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)6-8天，菌絲長滿全瓶，即為生產種茯苓菌種。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種茯苓菌種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟S3中采用蒸汽滅菌的方式進行滅菌處理，滅菌條件為溫度121℃，持續(xù)時間為30min。

3.根據(jù)權利要求1所述的一種茯苓菌種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟S5和步驟S7中先將紅糖用水溶化，放入松鋸末攪拌均勻，待松鋸末充分吸收糖液后，撈出與玉米面、小麥、麥麩、谷糠以及石膏粉攪拌均勻。

4.根據(jù)權利要求1所述的一種茯苓菌種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟S4中作為菌種的茯苓菌核內一塊白色茯苓肉在使用之前，對茯苓表面進行清洗及消毒。

5.根據(jù)權利要求4所述的一種茯苓菌種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟S4中將作為菌種的茯苓用水沖洗至無泥沙，擦干茯苓表面后用50-65％酒精進行沖洗，然后用無菌水進行沖洗以將酒精洗去。

6.根據(jù)權利要求1所述的一種茯苓菌種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟S4中培養(yǎng)母種菌絲時的接種量為每5mL的茯苓母菌，配步驟S3中的培養(yǎng)基300-350g。

7.根據(jù)權利要求1所述的一種茯苓菌種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟S4中檢查菌絲生長，接種5天后，查看菌絲體生長情況，發(fā)現(xiàn)死菌或菌絲生長緩慢，重復接菌。