[發(fā)明專利]一種?？嚯亩舅谹p-GT及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110763780.5
• 申請日: 2021-07-06
• 公開（公告）號: CN113735953B
• 公開（公告）日: 2023-04-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高炳淼;符金星;廖燕玲;吳鑫福
• 申請（專利權(quán)）人: 海南醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K1/04;C07K1/06;A01N37/46;A01P7/04
• 代理公司: 海南漢普知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 46003
• 代理人: 李海峰

1.一種?？嚯亩舅谹p-GT，其特征在于，

其序列為GIDCTCNGHNGEYWFGVQSCNGNAKHDCSSILGRCCVY，具有6個半胱氨酸，形成3個二硫鍵。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的?？嚯亩舅谹p-GT的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)取2-cl樹脂，用DCM?浸泡、洗滌；加入Fmoc-Tyr（tbu）-OH，加入DCM和DIEA反應(yīng)，再加入甲醇和DCM封閉反應(yīng)；

(2)用DMF洗滌步驟（1）處理后的樹脂，加入哌啶脫除Fmoc，反應(yīng)后再洗滌樹脂；

(3)取下一個氨基酸Fmoc-VAL-OH和HOBT，加入?DMF和?DIC反應(yīng)，反應(yīng)后再洗滌樹脂；

(4)用DMF洗滌步驟（3）處理后的樹脂，加入哌啶脫除Fmoc，反應(yīng)后再洗滌樹脂；

(5)重復(fù)(3)，(4)步驟直到肽鏈結(jié)束；

(6)取步驟（5）得到的樹脂，加入切割液，搖晃切割，過濾除去樹脂，得到切割后的濾液，最后將濾液加入冰乙醚，離心，收集底部多肽，得到粗品多肽；

(7)將粗品多肽用HPLC分離純化多肽，干燥，得到線性肽Ap-GT；

(8)取步驟(7)得到的線性肽Ap-GT進(jìn)行氧化折疊，得到氧化肽?Ap-GT?，采用制備型HPLC?對氧化肽?Ap-GT?進(jìn)行分離純化，得到純品。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的?？嚯亩舅谹p-GT的制備方法，其特征在于，步驟(1)，所述2-cl樹脂的取代度Sd=0.2?mmol/g。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的?？嚯亩舅谹p-GT的制備方法，其特征在于，步驟(1)，加入DCM、DIEA反應(yīng)的時間為80-100min，再加入甲醇、DCM封閉反應(yīng)的時間20-40min。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的?？嚯亩舅谹p-GT的制備方法，其特征在于，步驟(2)、步驟(4)，所述反應(yīng)的時間均為15-25min。

6.根據(jù)權(quán)利要求2或5所述的?？嚯亩舅谹p-GT的制備方法，其特征在于，步驟(3)，加入?DIC反應(yīng)的時間為0.8-1.2h。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的?？嚯亩舅谹p-GT的制備方法，其特征在于，步驟(6)，按質(zhì)量百分比計，所述切割液由三氟乙酸95%、水1%、3,4-乙烯二氧噻吩2%和三異丙基硅烷2%制得。

8.根據(jù)權(quán)利要求2或7所述的海葵多肽毒素Ap-GT的制備方法，其特征在于，步驟(6)，所述切割的時間為1.8-2.2h。

9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的海葵多肽毒素Ap-GT的制備方法，其特征在于，步驟(6)，所述離心條件：3000轉(zhuǎn)/min離心2?min。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的?？嚯亩舅谹p-GT在制備殺蟲劑中的應(yīng)用。