[發(fā)明專利]一種利用糞菌移植提高昆明犬幼犬抗運(yùn)輸應(yīng)激能力的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110761724.8
• 申請(qǐng)日: 2021-07-06
• 公開（公告）號(hào): CN113499350A
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹振輝;李杰;徐虎;杜津京;林秋葉;王孝義;胡天念;殷樺娟;茶光輝;李居?xùn)|;王昇文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南農(nóng)業(yè)大學(xué);公安部昆明警犬基地
• 主分類號(hào): A61K35/74
• 分類號(hào): A61K35/74;A61K35/24;A61P39/00;C12N1/20
• 代理公司: 北京慕達(dá)星云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 崔自京

本發(fā)明公開了一種利用糞菌移植提高昆明犬幼犬抗運(yùn)輸應(yīng)激能力的方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。包括以下步驟：糞便供體篩選；選擇養(yǎng)殖條件相同、警用性能優(yōu)良幼公犬的外祖母作為菌源供體；制備糞菌原液，低溫保存；移植時(shí)，制備糞菌移植液；灌胃至來(lái)源于同一健康外祖母、45～55日齡的不同健康幼公犬，連續(xù)灌胃≥14天；飼喂無(wú)抗飼料。本發(fā)明可以促進(jìn)血清中ALT、AST、CK、GLU、LDH、ACTH和COR濃度下降，進(jìn)而顯著提高幼犬的抗運(yùn)輸應(yīng)激能力。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，更具體的說是涉及一種利用糞菌移植提高昆明犬幼犬抗運(yùn)輸應(yīng)激能力的方法。

背景技術(shù)

昆明犬有草黃、狼青、黑背3個(gè)品系，其對(duì)高原氣候、嚴(yán)寒環(huán)境及高溫均具有較強(qiáng)的適應(yīng)性，且警用性能突出且易于訓(xùn)練，廣泛使用在邊防巡邏、偵查破案、搜查毒品和爆炸物等領(lǐng)域，服務(wù)于我國(guó)軍隊(duì)、公安刑偵戰(zhàn)線。

隨著大型活動(dòng)與賽事的增加，從各地調(diào)集警犬參與安檢搜爆工作任務(wù)的頻率越來(lái)越高。盡管專用警犬運(yùn)輸車具有的保障設(shè)施能在一定程度改善運(yùn)輸條件，但運(yùn)輸過程中裝卸、顛簸、饑渴、冷熱以及陌生環(huán)境刺激等因素，均可誘導(dǎo)警犬發(fā)生嚴(yán)重的應(yīng)激反應(yīng)。警犬對(duì)運(yùn)輸應(yīng)激的適應(yīng)能力有個(gè)體和品種差異，如不能適應(yīng)，就會(huì)出現(xiàn)精神萎靡、食欲不振、咳嗽、腹瀉、呼吸和心率加快，影響警用性能的發(fā)揮和完成工作任務(wù)的質(zhì)量，嚴(yán)重時(shí)休克和虛脫，甚至死亡，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

糞菌移植(Fecal Microbiota Transplantation,FMT)是指將健康供體動(dòng)物糞便的功能菌群移植到受體動(dòng)物的胃腸道中，通過調(diào)整、修復(fù)、重塑受體動(dòng)物的腸道菌群，達(dá)到治療動(dòng)物疾病、促進(jìn)生長(zhǎng)和提高免疫力的目的。已有研究證實(shí)，F(xiàn)MT可治療人類患者的炎癥性腸病和腸易激綜合癥，提高豬、雞的生長(zhǎng)性能和免疫力。而關(guān)于利用FMT技術(shù)提高警(軍)犬抗運(yùn)輸應(yīng)激能力的方法，尚無(wú)見文獻(xiàn)報(bào)道。

因此，如何提供利用糞菌移植提高昆明犬幼犬抗運(yùn)輸應(yīng)激能力的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員亟需解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供了一種利用糞菌移植提高昆明犬幼犬抗運(yùn)輸應(yīng)激能力的方法，對(duì)于警(軍)犬工作具有重要經(jīng)濟(jì)和社會(huì)意義。同時(shí)，簡(jiǎn)單易行，可操作性強(qiáng)，應(yīng)用前景廣闊。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種利用糞菌移植提高昆明犬幼犬抗運(yùn)輸應(yīng)激能力的方法，包括以下步驟：

(1)糞便供體篩選：選擇養(yǎng)殖條件相同、警用性能優(yōu)良幼公犬的外祖母作為菌源供體；

(2)采集供體的新鮮糞便預(yù)處理，在無(wú)菌條件下，通過溶解、過濾、離心、懸浮制備糞菌原液，加入無(wú)菌甘油，得糞菌原液，凍存?zhèn)溆茫?/p>

(3)移植時(shí)，溶解凍存的糞菌原液，離心去除甘油和上清液，加入0.9％無(wú)菌生理鹽水，重懸沉淀制備糞菌移植液；

(4)將糞菌移植液灌胃至來(lái)源于同一健康外祖母、45～55日齡的不同健康幼公犬，連續(xù)灌胃≥14天；飼喂無(wú)抗飼料。

進(jìn)一步的：幼公犬和外祖母養(yǎng)殖條件相同。

警用性能優(yōu)良：根據(jù)幼犬警用素質(zhì)行為評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，得分在37分以上。

有益效果在于：新生哺乳動(dòng)物腸道菌群具有強(qiáng)烈的母源性特征，母體來(lái)源的微生物在子代腸道菌群的形成過程中發(fā)揮重要作用，而幼齡動(dòng)物的腸道菌群又對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝、免疫系統(tǒng)的激活以及腸屏障功能的構(gòu)建發(fā)揮重要作用，故不選擇幼犬父系作為供體。另一方面，一般來(lái)說每頭母犬平均每胎可生7-9頭幼犬，如果選擇幼犬的母親，就必須將幾頭甚至更多的幼犬母親的糞便進(jìn)行混合，而混合操作會(huì)破壞糞菌液中發(fā)揮作用的厭氧菌的豐度和多樣性，從而影響糞菌移植效果，而選擇幼犬的外祖母，采集其糞便制備糞菌移植液，可減少操作，增加糞菌液中厭氧菌的數(shù)量和豐富，從而保證糞菌移植的效果。

優(yōu)選的：步驟(1)供體為狼青品系昆明犬；選擇標(biāo)準(zhǔn)如下：