[發明專利]一種具有廣譜裂解活性的抗菌肽P104、裂解酶LysP53及其應用有效
| 申請號： | 202110760643.6 | 申請日： | 2021-07-05 |
| 公開（公告）號： | CN113549610B | 公開（公告）日： | 2022-11-11 |
| 發明（設計）人： | 危宏平;楊航;李唱唱;余軍平;蔣夢薇 | 申請（專利權）人： | 中國科學院武漢病毒研究所 |
| 主分類號： | C12N9/88 | 分類號： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/51;A61P31/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武漢天領眾智專利代理事務所(普通合伙) 42300 | 代理人： | 楊建軍 |
| 地址： | 430000 湖北省武*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 具有 廣譜 裂解 活性 抗菌 p104 lysp53 及其 應用 | ||
1.一種具有廣譜裂解活性的抗菌肽P104，其特征在于，所述抗菌肽P104的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如權利要求1所述的具有廣譜裂解活性的抗菌肽P104，其特征在于，所述抗菌肽P104的基因序列如SEQ ID NO.3所示。
3.一種具有廣譜裂解活性的裂解酶LysP53，其特征在于，所述裂解酶LysP53包含權利要求1所述的抗菌肽P104，所述裂解酶LysP53的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.如權利要求3所述的具有廣譜裂解活性的裂解酶LysP53，其特征在于，所述裂解酶LysP53的基因序列如SEQ ID NO.4所示。
5.如權利要求3或4所述的具有廣譜裂解活性的裂解酶LysP53，其特征在于，擴增所述裂解酶LysP53核苷酸序列的引物序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
6.含有權利要求4所述裂解酶LysP53基因的重組表達載體，其特征在于，所述重組表達載體為原核表達載體pET28a-LysP53。
7.含有權利要求6所述重組表達載體的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為大腸桿菌BL21(DE3)。
8.如權利要求3或4所述的具有廣譜裂解活性的裂解酶LysP53，其特征在于，所述裂解酶LysP53的制備方法包括如下步驟：
S1、從噬菌體P53基因組中擴增裂解酶LysP53基因；
S2、構建表達所述裂解酶LysP53基因的重組表達載體pET28a-LysP53；
S3、將所述重組表達載體pET28a-LysP53轉化大腸桿菌BL21(DE3)感受態細胞，篩選得到表達所述裂解酶LysP53基因的工程菌；
S4、使用IPTG進行誘導表達，獲得重組基因表達產物；
S5、將重組基因表達產物，經鎳柱純化分離，得到所述裂解酶LysP53。
9.權利要求1所述的具有廣譜裂解活性的抗菌肽P104和/或權利要求3所述的具有廣譜裂解活性的裂解酶LysP53在裂解革蘭氏陰性菌中的應用。
10.如權利要求9所述的應用，其特征在于，所述革蘭氏陰性菌包括以下幾種：鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌和大腸桿菌。
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