[發明專利]一種利用低共熔溶劑提取銀耳多糖的方法

在審

• 申請號: 202110756244.2
• 申請日: 2021-07-05
• 公開（公告）號: CN113354754A
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 馬霞;魏雅姝;何艷
• 申請（專利權）人: 上海應用技術大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

本發明公開了一種利用低共熔溶劑提取銀耳多糖的方法。本發明的提取方法包括：將凍干銀耳孢子發酵液與上述低共熔溶劑混合；然后將混合物水浴提取，經離心，得到銀耳多糖浸提液；向銀耳多糖浸提液中加入溶劑，經混勻、靜置、離心，取沉淀物經洗滌、離心、凍干，得到銀耳多糖。所述低共熔溶劑包括氫鍵供體、氫鍵受體及去離子水，所述氫鍵供體為甘油，所述氫鍵受體為氯化膽堿。本發明利用低共熔溶劑法提取銀耳多糖，低共熔溶劑合成方法是氯化膽堿和甘油經過加熱后，以氫鍵結合到一起形成低共熔溶劑，作為一種溶劑用于萃取銀耳孢子發酵液中的銀耳多糖，具有可操作性強，工藝簡便，成本低的優點，同時原料易獲取、可再生、可降解、可回收。

技術領域

本發明涉及一種利用低共熔溶劑提取銀耳多糖的方法，屬于生物工程技術領域。

背景技術

多糖是一種高分子的聚合物,由成千上萬個單糖通過糖普鍵連接而成。多糖廣泛分布于自然界，植物、動物、微生物體內均有存在。天然多糖可用于臨床試驗，如抗糖尿病、抗腫瘤、降血脂等病癥的治療或者作為抗炎、抗病毒的藥物，多糖對于維持人體正常運行具有重要的作用。

銀耳(Tremella fuciformis)，又稱“銀耳菇”，它屬于銀耳目和銀耳科，是一種可食用菌。銀耳多糖是主要活性成分，主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和鼠李糖組成，具有抗氧化、抗腫瘤、抑制炎癥等多種生理活性。發酵方法可以通過培養基組成和其他因素來豐富多糖的成分和分子量。發酵銀耳多糖相比于傳統子實體提取銀耳多糖分子量更小，活性更強。銀耳多糖無毒無害，具有很高的應用價值。

低共熔溶劑(DESs)通常是由氫鍵受體(通常是氯化膽堿)和氫鍵供體(通常是天然植物基有機離子，如氨基酸、有機酸、糖等)組成的共晶混合物。DESs的成分不僅能夠通過氫鍵相互結合，而且能夠提供或接受外部電子或質子以形成氫鍵。氫鍵受體通常采用季銨鹽，如便宜可得、易降解、無毒的氯化膽堿，而氫鍵受體則可選擇尿素、乙二醇、丙三醇、草酸、乳酸、葡萄糖、甘油等。在將兩種化合物混合過程中由于陰離子和氫鍵供體之間形成的氫鍵引發電荷的離域，導致低共熔溶劑的熔點低于各組分化合物的熔點。低共熔溶劑相較于其他離子液體具有價格低廉，容易獲取等優點。

目前，采用低共熔溶劑從銀耳孢子發酵液中提取銀耳多糖的研究尚未見報道。

發明內容

本發明解決的技術問題是：如何通過一種簡單、高效、綠色環保的方法提取得到高純度的銀耳多糖。

為了解決上述技術問題，本發明提供了一種利用低共熔溶劑提取銀耳多糖的方法，包括以下步驟：

步驟1：以甘油為氫鍵供體，氯化膽堿為氫鍵受體，加入去離子水配制低共熔溶劑；

步驟2：將凍干銀耳孢子發酵液與步驟1配制得到的低共熔溶劑混合，然后在80℃水浴中提取，經離心，得到銀耳多糖浸提液；

步驟3：向銀耳多糖浸提液中加入溶劑，經混勻、靜置、離心，取沉淀物經洗滌、離心后，將沉淀加入蒸餾水中，水浴提取后采用透析袋透析，然后再次離心，收集上清液，將上清液凍干后獲得銀耳多糖。

優選地，其特征在于，所述步驟1中的氫鍵受體、氫鍵供體與去離子水的摩爾比為1：1～3：40～80。

優選地，所述步驟1中低共熔溶劑的配制方法為：將氫鍵受體、氫鍵供體與水混合，于80℃水浴下攪拌至澄清透明，放置一段時間后，溶液無晶體析出，得到低共熔溶劑。

優選地，所述步驟2中銀耳孢子發酵液與低共熔溶劑的比例為1～5g:10～50mL。

優選地，所述步驟3中的溶劑為乙醇，所述乙醇的體積濃度為95％。

優選地，所述步驟3中銀耳多糖浸提液與溶劑的體積比為1:4。

優選地，所述步驟3中蒸餾水的體積與步驟2中的凍干銀耳孢子發酵液的質量之比為100mL：1g。