[發(fā)明專利]FGF7在制備干細(xì)胞擴(kuò)增與表型維持試劑中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110755723.2
• 申請(qǐng)日: 2021-07-05
• 公開（公告）號(hào): CN113717933B
• 公開（公告）日: 2023-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳曉;張鴻;茵梓;沈煒亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N5/0775
• 分類號(hào): C12N5/0775;C12N5/077;A61K35/28;A61K35/32;A61P21/00
• 代理公司: 天津知川知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 12249
• 代理人: 胡翠

1.成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子7(FGF7)和/或FGF7合成肽在制備維持干細(xì)胞擴(kuò)增和表型的試劑中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述的表型包括干細(xì)胞表型和腱系表型。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述的干細(xì)胞為肌腱干細(xì)胞、韌帶干細(xì)胞、半月板干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞、骨骼干細(xì)胞或肌肉干細(xì)胞；更優(yōu)選地，所述干細(xì)胞為肌腱干細(xì)胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：以試劑的總體積計(jì)，所述FGF7和/或FGF7合成肽濃度范圍為1-100ng/ml；優(yōu)選地，所述FGF7和/或FGF7合成肽濃度范圍為5-70ng/ml；更優(yōu)選地，所述FGF7和/或FGF7合成肽濃度為10-40ng/ml。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述試劑還包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基；所述基本培養(yǎng)基為DMEM低糖培養(yǎng)基、DMEM高糖培養(yǎng)基、DMEM/F12培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基、F10培養(yǎng)基、MEM培養(yǎng)基、BEM培養(yǎng)基、RPMI 1640培養(yǎng)基、Media 199培養(yǎng)基、IMDM培養(yǎng)基、mTesR培養(yǎng)基、E8培養(yǎng)基。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于：所述試劑還包括血清、生長(zhǎng)因子、小分子、激素、蛋白質(zhì)、合成肽、多胺類、脂類、礦物質(zhì)、糖類、有機(jī)酸、氨基酸、還原劑、維生素、微量元素、抗生素、緩沖劑和pH值調(diào)節(jié)劑中任意一種或兩種以上成分。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述培養(yǎng)的方式包含二維培養(yǎng)、三維培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、靜態(tài)培養(yǎng)、動(dòng)態(tài)培養(yǎng)中任意一種或多種。

8.一種維持干細(xì)胞擴(kuò)增和干細(xì)胞表型和腱系表型的干細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法，該方法包括如下步驟：將成纖維生長(zhǎng)因子7(FGF7)和/或FGF7合成肽制備的試劑與干細(xì)胞接觸，用于干細(xì)胞的體外培養(yǎng)；

所述的干細(xì)胞為肌腱干細(xì)胞、韌帶干細(xì)胞、半月板干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、脂肪干細(xì)胞、骨骼干細(xì)胞或肌肉干細(xì)胞；更優(yōu)選地，所述干細(xì)胞為肌腱干細(xì)胞。

優(yōu)選地，以試劑的總體積計(jì)，所述FGF7和/或FGF7合成肽濃度范圍為1-100ng/ml。優(yōu)選地，所述FGF7和/或FGF7合成肽濃度范圍為5-70ng/ml；更優(yōu)選地，所述FGF7和/或FGF7合成肽濃度為10-40ng/ml。

所述試劑還包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基；所述基本培養(yǎng)基為DMEM低糖培養(yǎng)基、DMEM高糖培養(yǎng)基、DMEM/F12培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基、F10培養(yǎng)基、MEM培養(yǎng)基、BEM培養(yǎng)基、RPMI 1640培養(yǎng)基、Media199培養(yǎng)基、IMDM培養(yǎng)基、mTesR培養(yǎng)基、E8培養(yǎng)基；

所述試劑還包括血清、生長(zhǎng)因子、小分子、激素、蛋白質(zhì)、合成肽、多胺類、脂類、礦物質(zhì)、糖類、有機(jī)酸、氨基酸、還原劑、維生素、微量元素、抗生素、緩沖劑和pH值調(diào)節(jié)劑中任意一種或兩種以上成分；

所述培養(yǎng)的方式包含二維培養(yǎng)、三維培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、靜態(tài)培養(yǎng)、動(dòng)態(tài)培養(yǎng)中任意一種或多種。

9.一種干細(xì)胞，其特征在于：由權(quán)利要求8所述的體外培養(yǎng)方法獲得。

10.權(quán)利要求9所述的干細(xì)胞作為用于制備人和/或動(dòng)物的組織損傷的藥物或細(xì)胞制劑中的應(yīng)用。