[發明專利]一種酶法制備人參皂苷F1的方法及其應用

在審

• 申請號: 202110755134.4
• 申請日: 2021-07-05
• 公開（公告）號: CN113481274A
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 周義發;范玉瑩;原野;孟煜晗;胡晨星;李葦荔
• 申請（專利權）人: 東北師范大學
• 主分類號: C12P33/20
• 分類號: C12P33/20;A61K31/7032;A61P3/10;A61P3/06;A61P3/04
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 李博

本發明涉及生物醫學領域，提供了一種酶法制備人參皂苷F1的方法及其應用，所述方法直接采用糖苷水解酶BglSK水解糖基實現皂苷之間的轉化，反應時間短，成本低，反應條件更溫和，F1粗品中的副產物含量少，容易純化，原料轉化率、純度和產率均有提升。同時制備得到的人參皂苷F1能夠降低血脂含量，減少白色脂肪沉積，降低血糖，改善胰島素抵抗，加速能量消耗，具有作為降血脂、降血糖和減肥藥物的良好潛力。

技術領域

本發明涉及生物醫學領域，具體涉及一種酶法制備人參皂苷F1的方法及其應用。

背景技術

肥胖癥是一種慢性代謝性疾病，指的是機體脂肪分布異常和(或)堆積過多、體重增加。肥胖也是心腦血管疾病、II型糖尿病、骨關節病等發生的危險因素。肥胖導致一系列并發癥或相關疾病，影響人類壽命、導致人類生活質量下降。

肥胖的發生是由于機體內熱量的攝入大于消耗，造成體內脂肪堆積過多。研究證實體內的脂肪組織可以分為兩大類：分布于皮下、腸系膜等部位的白色脂肪組織(Whiteadipose tissue，WAT)和存在于頸部周圍、肩胛間、肋骨周圍等部位少量的棕色脂肪組織(Brown adipose tissue，BAT)。通常所稱肥胖是WAT過多堆積體內造成的；而BAT是寒冷適應條件下非戰栗產熱的主要器官，可以通過消耗能量、產熱來維持機體的能量代謝平衡。

肥胖發病機制復雜，目前尚無一個很好的藥物靶點。在減肥藥物開發過程中，很多藥物都通過作用于神經攝食中樞發揮作用，可能伴隨抑郁和焦慮的副作用；同時研究人員對作用于外周的藥物在多種組織中的機理了解不夠透徹，可能出現意外的副作用，如肽激素類似物的免疫原性風險等。然而從新的角度——能量平衡來看，通過增大機體能量消耗以達到減重的效果可以成為一個新的肥胖治療策略，為潛在減肥藥物的發現提供了新的方向。

人參(PanaxginsengC.A.Mey.)是五加科(Araliaceae)人參屬(Panax)草本植物，是產于我國東北地區的一味名貴藥材。如今，人參成為全世界使用最廣泛的中草藥之一。人參含有多種有效成分，包括人參皂苷、人參多糖、肽、氨基酸、微量元素及有機酸等，其中人參皂苷是人參的主要活性成分，具有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、抗疲勞和提高人體免疫力的作用。人參皂苷是由糖基通過糖苷鍵與人參皂苷元相連構成的糖苷類化合物。其糖鏈的組成與藥理學活性具有密切的關系。根據含量不同，可分為主要人參皂苷(如Rb1、Rb2、Rc、Rd等)和稀有人參皂苷(Rg3、Rh1、F1、CK等)，其中人參皂苷F1是三醇型人參皂苷。人參皂苷F1是人參皂苷Rg1和三七皂苷R1的腸內菌代謝產物，在天然藥材中含量較低，目前僅在人參葉及花中分離得到過。人參中人參皂苷的含量占2-4％，皂苷種類較多，已經鑒定的種類有70余種。人參皂苷F1在諸多方面具有較強的藥理活性：人參皂苷F1被吸收到血液中，可以在其中發揮雌激素作用；它也表現出抗癌作用，顯示出對B16細胞增殖的強烈抑制作用；它具有抗衰老和抗氧化作用，并且對CYP3A4的活性具有競爭性抑制作用，對CYP2D6的活性具有較弱的抑制作用；人參皂苷F1對于角質形成細胞也具有較好的保護作用等等。

研究表明稀有皂苷含量在野生人參中很少甚至沒有。而這些稀有皂苷相比于糖基化的人參具有較好的藥理學活性。但由于含量低，制備和生產受到限制。酶法制備稀有人參皂苷有專一的選擇性、高效的轉化率和產率，是很有潛力的方法。因此，可以通過酶法選擇性水解原有人參皂苷的糖基來制備稀有人參皂苷是非常有必要的。