[發明專利]一種異鼠李素光親和探針及其合成方法和應用

在審

• 申請號: 202110743872.7
• 申請日: 2021-07-01
• 公開（公告）號: CN114685463A
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發明（設計）人: 朱明彥;鄭藝;乃皮賽·吐遜買買提
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C07D405/12
• 分類號: C07D405/12;A61P35/00;G01N21/64
• 代理公司: 上?？剖⒅R產權代理有限公司 31225
• 代理人: 許耀

1.一種異鼠李素光親和探針，其特征在于，該探針以異鼠李素為活性基團，雙吖丙啶為光交聯基團，炔烴為生物正交基團，具有如下所示結構：

2.一種如權利要求1所述的異鼠李素光親和探針的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：將槲皮素加入無水二氯甲烷和DMF混合溶液中攪拌溶解，在冰浴下加入N,N-二異丙基乙胺和氯甲基甲基醚，攪拌0.5～1.5h，然后恢復至室溫反應16～18h，反應完成后，旋蒸除去溶劑、萃取、干燥、柱層析純化得到中間體1，中間體1的結構式如下所示：

S2：將步驟S1得到的中間體1和K₂CO₃加入無水DMF溶液中攪拌溶解，向溶液中加入光交聯基團(3-(3-炔-1-丁基)-3-(2-碘乙基)-3H-雙吖丙啶)，并在62～68℃加熱回流反應48～96h，旋蒸除去溶劑、萃取、干燥、柱層析純化得到中間體2，中間體2的結構式如下所示：

S3：將步驟(2)所得中間體2加入丙酮溶液中攪拌溶解，在冰浴下向溶液中加入2.5～3.5N HCl，攪拌0.5～1.5h，然后恢復至室溫反應5～7d；反應結束后加入水淬滅反應，萃取、洗滌、干燥，旋干溶劑，柱層析純化得到化合物3，化合物3的結構式如下所示：

化合物3即為所述的異鼠李素光親和探針。

3.根據權利要求2所述的一種異鼠李素光親和探針的合成方法，其特征在于，步驟S1中，包括以下條件中的任一項或多項：

(i)槲皮素、N,N-二異丙基乙胺和氯甲基甲基醚的摩爾之比為1:(3～4):8；

(ii)槲皮素與(無水二氯甲烷和DMF混合溶液)的質量：體積之比為1g:(200～300)mL；

(iii)無水二氯甲烷和DMF混合溶液中，無水二氯甲烷和DMF的體積之比為(20～15):1。

4.根據權利要求2所述的一種異鼠李素光親和探針的合成方法，其特征在于，步驟S2中，包括以下條件中的任一項或多項：

(i)中間體1、K₂CO₃和光交聯基團(3-(3-炔-1-丁基)-3-(2-碘乙基)-3H-雙吖丙啶)的摩爾之比為1:(1.2～1.3):2；

(ii)中間體1與無水DMF溶液的用量之比為10mg:(0.5～1)mL。

5.根據權利要求2所述的一種異鼠李素光親和探針的合成方法，其特征在于，步驟S3中，包括以下條件中的任一項或多項：

(i)丙酮與HCl的體積之比為(5～7):1；

(ii)中間體2與丙酮的用量之比為10mg:(0.5～1)mL。

6.一種如權利要求1所述的異鼠李素光親和探針在癌細胞成像中的應用。

7.根據權利要求6所述的異鼠李素光親和探針的應用，其特征在于，所述的癌細胞包括乳腺癌細胞MDA-MB-231、結腸癌細胞HCT-116或前列腺癌細胞PC-3。

8.一種如權利要求1所述的異鼠李素光親和探針在癌細胞原位鑒定異鼠李素直接作用靶蛋白中的應用。

9.根據權利要求7所述的異鼠李素光親和探針的應用，其特征在于，所述的靶蛋白與探針共價結合，通過紫外照射，實現探針中的雙吖丙啶基團與包括癌細胞增殖、侵襲在內的生物過程相關蛋白的共價交聯。

10.根據權利要求8或9所述的異鼠李素光親和探針的應用，其特征在于，所述的癌細胞包括乳腺癌細胞MDA-MB-231、結腸癌細胞HCT-116或前列腺癌細胞PC-3。