[發(fā)明專利]一種檢測抗Prelamin A/C-IgG抗體的試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110743530.5
• 申請日: 2021-07-01
• 公開（公告）號: CN113466451B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 葉青;毛建華;韓秀翠
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號: G01N33/564
• 分類號: G01N33/564;G01N33/545;G01N33/548;G01N33/543
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 33200
• 代理人: 趙杭麗

本發(fā)明提供一種檢測抗Prelamin A/C?IgG抗體的試劑盒，由抗原蛋白Prelamin A/C、固相載體、標(biāo)準(zhǔn)品、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品、標(biāo)記抗體、底物顯色液、抗體和抗原稀釋液、樣品稀釋緩沖液、洗滌液、終止液等組成。本發(fā)明利用抗Prelamin A/C?IgG抗體對應(yīng)的靶抗原Prelamin A/C，以人抗標(biāo)簽肽的IgG作為定量檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，對血清中形成的抗原抗體復(fù)合物進(jìn)行抗Prelamin A/C?IgG抗體檢測。本發(fā)明首次提出以抗Prelamin A/C?IgG抗體檢測作為免疫性腎病綜合癥的生物標(biāo)志物。本發(fā)明可用于該自身抗體的檢測，為自身免疫性腎病綜合征的研究和臨床診療提供了支持。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種檢測抗Prelamin A/C-IgG抗體的試劑盒。本發(fā)明首次為免疫性腎病綜合征提供了一種快速簡便且高靈敏地定性或定量分析血清中抗Prelamin A/C-IgG水平的檢測試劑盒。

背景技術(shù)

免疫性腎病綜合征的診斷和治療是生物醫(yī)學(xué)科學(xué)中的一項持續(xù)的挑戰(zhàn)。腎病綜合征是一類因腎小球濾過膜的通透性增加，導(dǎo)致血漿蛋白的濾出增多，從而引發(fā)大量的蛋白尿的一系列特征性的病理變化的臨床綜合癥。在很大程度上所表現(xiàn)出的許多癥狀可以由多樣的原因引發(fā)(包括先天遺傳原因、腎功能損害與功能不全、泌尿生殖道的感染與疾病、藥物濫用、食欲不振及營養(yǎng)不良、糖尿病、高血壓、感染、損傷、免疫的缺陷和癌癥)。

腎病綜合征的早期診斷與預(yù)測尤為重要。原發(fā)性腎病綜合征的年發(fā)病率因種族和國籍而異，大約在1.15～16.9/10,0000。微小病變性腎病綜合征是最為常見的病理類型，這類病人絕大多數(shù)對激素治療敏感，但是10％～20％左右的患兒會出現(xiàn)激素耐藥，此類患兒在診斷后的5年內(nèi)進(jìn)展為終末期腎病的概率為8％～35％，在診斷后的15年內(nèi)進(jìn)展為終末期腎病的概率為24％～66％。

Ali等學(xué)者觀察發(fā)現(xiàn)難治性微小病變的病人的腎臟被移植到受者體內(nèi)后，腎臟功能轉(zhuǎn)為正常并未出現(xiàn)蛋白尿，由此發(fā)生蛋白尿的可能主要是供者的內(nèi)環(huán)境出現(xiàn)了某些方面的問題。除部分因基因缺陷而發(fā)病的患兒，大部分原發(fā)性腎病綜合征的患兒在接受了激素和免疫抑制劑的治療后，病情都發(fā)生了明顯的好轉(zhuǎn)，因此原發(fā)性腎病綜合征的發(fā)生可能與患者的自身免疫狀況密切相關(guān)。

抗原結(jié)合B細(xì)胞表面的BCR，而后通過Igα/Igβ轉(zhuǎn)導(dǎo)到B細(xì)胞內(nèi)，這是B細(xì)胞活化的第一信號。同時Th細(xì)胞上表達(dá)的CD154分子與B細(xì)胞表面的CD40分子的相互作用為B細(xì)胞的有效活化提供第二信號。這是B細(xì)胞增殖、生發(fā)中心反應(yīng)以及最終分化為漿細(xì)胞的至關(guān)重要的信號。此類漿細(xì)胞能夠合成并分泌針對上述抗原的特異抗體。近年來的研究發(fā)現(xiàn)B細(xì)胞功能異常在原發(fā)性腎病綜合征中發(fā)揮了重要的作用。激素敏感型腎病綜合征患者疾病復(fù)發(fā)時，其外周血中的B細(xì)胞的數(shù)量會顯著增加，激素依賴型腎病綜合征病人體內(nèi)檢測到大量的被活化的B細(xì)胞，而處于緩解期的激素敏感型腎病綜合征患者體內(nèi)B細(xì)胞的數(shù)量則明顯下降。同時發(fā)現(xiàn)糖皮質(zhì)激素不能有效的抑制激素敏感型或激素依賴型腎病綜合征患者體內(nèi)B細(xì)胞的活化。

環(huán)磷酰胺和利妥昔單抗能在激素依賴性的疾病患者體內(nèi)通過清除B細(xì)胞而達(dá)到停藥后誘導(dǎo)病人的長期緩解。利妥昔單抗可以與前B細(xì)胞和成熟B細(xì)胞表面的跨膜抗原CD20特異性地結(jié)合，通過激活補(bǔ)體，抗體依賴的細(xì)胞毒性作用，及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的三種途徑來清除B細(xì)胞，從而發(fā)揮免疫抑制作用。此外，記憶B細(xì)胞(特別是轉(zhuǎn)換的記憶B細(xì)胞數(shù)量)可以預(yù)測利妥昔單抗治療后的復(fù)發(fā)情況。雖然全球多個多中心的臨床研究發(fā)現(xiàn)利妥昔單抗能成功的用于微小病變腎病綜合征的治療，但有研究發(fā)現(xiàn)利妥昔單抗在治療激素依賴性腎病綜合征的過程中，其清除B細(xì)胞的作用能維持大約5個月左右，繼后在6到7個月左右隨著B細(xì)胞的數(shù)量回升，病情也會復(fù)發(fā)。由此可知原發(fā)性腎病綜合征的患者體內(nèi)有病理性B細(xì)胞的克隆，這些病理性B細(xì)胞的克隆的鑒別和精準(zhǔn)清除顯得尤為重要。

Prelamin A/C是一種較長的前體，在體內(nèi)會經(jīng)歷一系列的翻譯后修飾，從而形成成熟的Lamin A。Lamin A/C基因中的多種突變與不同的疾病相關(guān)聯(lián)，包括肌肉營養(yǎng)不良，擴(kuò)張型心肌病，早衰綜合癥等。