[發明專利]一種檢測抗過氧化物還原酶-1-IgG抗體的試劑盒

有效

• 申請號: 202110743523.5
• 申請日: 2021-07-01
• 公開（公告）號: CN113447658B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 葉青;毛建華;田丹丹
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/573;G01N33/543
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 趙杭麗

1. 一種過氧化物還原酶-1抗原蛋白在制備用于診斷自身免疫性腎病綜合征的檢測試劑盒中的應用，其特征在于，所述試劑盒由抗原蛋白peroxiredoxin-1、固相載體、標記抗體、抗原稀釋液、樣品稀釋緩沖液、抗體稀釋液、底物顯色劑、洗滌液、標準品、陽性質控品、陰性質控品組成；所述抗原蛋白peroxiredoxin-1的序列如SEQ ID:1所示；所述標記抗體為酶標記、化學發光劑標記或生物素標記的二抗；所述標準品和陽性質控品為重組人抗標簽肽免疫球蛋白G或其片段，或從血清中提取抗peroxiredoxin-1-IgG抗體作為陽性質控品和標準品，健康體檢者血清為陰性質控品。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的抗原蛋白peroxiredoxin-1上帶有標簽肽，所述的標簽肽為：His標簽、硫氧還蛋白、GST標簽、麥芽糖結合蛋白、谷胱甘肽轉移酶的SA標簽、c-Myc標簽、Flag標簽或生物素標簽。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述抗原蛋白peroxiredoxin-1經鎳柱親和層析、分子篩層析、凝膠過濾層析、離子交換柱層析、疏水柱純化。

4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述抗原蛋白peroxiredoxin-1固定于固相載體上，所述固相載體選用尼龍膜、硝酸纖維素膜、聚苯乙烯微孔板、離子交換樹脂、磁微粒。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，利用物理吸附或共價鍵結合或化學結合將peroxiredoxin-1抗原蛋白通過直接的方式固定于固相載體上。

6.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述底物顯色劑為TMB、過氧化氫、4-MUP、AMPPD、BCIP；所述抗原稀釋液為含有163mM NaCl、1％ TritonX-100的1x PBS pH7.4；所述樣品稀釋緩沖液為含有10％ BSA的0.01M PBS pH7.4；所述抗體稀釋液為含有1M D-glucose、2％ 甘油、0.35％ Tween20的0.01M PBS pH7.4；所述洗滌液為：含有163mM NaCl、10％ 甘油、1％ TritonX-100的1x PBS pH7.4。