[發明專利]一種用于檢測諾氟沙星的試劑盒及檢測方法在審
| 申請號： | 202110736491.6 | 申請日： | 2021-06-30 |
| 公開（公告）號： | CN113406330A | 公開（公告）日： | 2021-09-17 |
| 發明（設計）人： | 寧保安;孫鐵強;韓振宇;姚站馨;高蔚娜;張予弦;陳宗粉;楊涵;郭長江 | 申請（專利權）人： | 軍事科學院軍事醫學研究院環境醫學與作業醫學研究所 |
| 主分類號： | G01N33/58 | 分類號： | G01N33/58;G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京豐浩知識產權代理事務所(普通合伙) 11781 | 代理人： | 董亞男 |
| 地址： | 300050*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 檢測 諾氟沙星 試劑盒 方法 | ||
1.一種用于檢測諾氟沙星的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：
(1)諾氟沙星-生物素標記物；
(2)諾氟沙星多克隆抗體；所述諾氟沙星多克隆抗體包被于多孔板上；
(3)修飾有鏈霉親和素的堿性磷酸酶；
(4)金納米粒子；所述金納米粒子包括連接有疊氮基的金納米粒子和連接有炔基的金納米粒子，所述金納米粒子用于檢測一價銅離子；
(5)抗壞血酸磷酸；
(6)硫酸銅溶液；
(7)銅離子探針；所述銅離子探針用于檢測二價銅離子；
所述諾氟沙星-生物素標記物用于與所述諾氟沙星多克隆抗體結合，且用于與所述修飾有鏈霉親和素的堿性磷酸酶結合；
所述修飾有鏈霉親和素的堿性磷酸酶用于還原所述抗壞血酸磷酸為抗壞血酸，所述抗壞血酸用于將所述硫酸銅溶液中的二價銅離子還原為一價銅離子。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述金納米粒子的直徑為13～17nm；
優選的，所述連接有疊氮基的金納米粒子和所述連接有炔基的金納米粒子的摩爾比為1：1；
更優選的，所述金納米粒子的濃度為0.5～2OD。
3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述諾氟沙星-生物素標記物中，每1mg諾氟沙星上標記有生物素0.02～0.06mg；優選為0.04mg；
優選的，所述諾氟沙星-生物素標記物的濃度為0.6～1mg/mL，優選為0.8mg/mL；
更優選的，所述諾氟沙星-生物素標記物保存于甲醇中。
4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述多孔板上諾氟沙星多克隆抗體包被量為50～200μg/孔，優選為100μg/孔。
5.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，抗壞血酸磷酸的濃度為1～3mM，優選2mM。
6.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，硫酸銅溶液的濃度為1～3mM，優選為2mM；
優選的，銅離子探針的濃度為10～30μM，優選為20μM，保存于pH＝7.2的Tris-HCl：CH3CN體積比為1:1的混合溶劑中。
7.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還含有諾氟沙星標準品；
優選的，所述諾氟沙星標準品的濃度為10-6pg/mL～107pg/mL；
更優選的，所述諾氟沙星標準品采用稀釋液配制得到，所述稀釋液為含有體積百分比為10％甲醇的1X PBS緩沖液。
8.根據權利要求1～7任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述銅離子探針用于輸出熒光信號；所述金納米粒子用于輸出可視化信號。
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