[發明專利]一種S形光纖錐免疫傳感器、制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202110733686.5
• 申請日: 2021-06-30
• 公開（公告）號: CN113406324B
• 公開（公告）日: 2023-01-24
• 發明（設計）人: 于永森;郭萬美;國旗;王博;金光勇
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司 22201
• 代理人: 劉世純

1.一種S形光纖錐免疫傳感器的制備方法，其特征在于，具體步驟如下：

(1)、S形光纖錐的制備：

取一段30-60cm長的光纖，然后用光纖鉗剝去中間2-4cm的涂覆層，最后用酒精棉沿著光纖軸向的同一方向將剝去涂覆層部分的光纖擦拭干凈即完成光纖預處理；調整熔接機兩端光纖夾具，使其在軸向錯開100-250μm的距離，然后將預處理好的光纖平直地放置在熔接機的槽里，調整光纖的放置位置，使熔接機的放電電極正對著剝去涂覆層光纖的中間部位，最后用兩端的光纖夾具將其固定；設置熔接機拉錐的放電時間和放電電流，分為兩個階段：第一階段放電時間為7-15ms，放電電流為8-16mA；第二階段放電時間為6-12ms，放電電流為6-10mA；最后按下熔接機上的“Fuse”按鍵，熔接機開始放電拉錐；

(2)、氧化石墨烯和金納米粒子修飾S形光纖錐：

將步驟(1)中制備的S形光纖錐進行生物功能化，具體步驟如下：將S形光纖錐浸入丙酮靜置10-60min，清洗干凈后再浸入濃度為0.5-2M的NaOH水溶液中靜置1-4h；然后用體積濃度為1％-10％的3-氨丙基三乙氧基硅烷-水溶液浸泡1-6h，清洗后在50℃-150℃條件下加熱5-20min，接著用氧化石墨烯乙醇溶液浸泡1-6h；再用體積濃度為0.01-1％的3-巰丙基三乙氧基硅烷-苯溶液浸泡2-10h，最后再用膠體金溶液浸泡5-30h；

(3)、納米抗體的綁定：

對步驟(2)中制備的氧化石墨烯/金納米粒子功能化的S形光纖錐進一步修飾生物探針分子以實現對癌胚抗原特異性識別，步驟如下：將氧化石墨烯/金納米粒子功能化的S形光纖錐浸入濃度為10-40mM的11-巰基十一烷酸乙醇溶液中靜置10-60min；在濃度為10-40mM1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺的2-(N-嗎啉基)乙磺酸緩沖液中浸泡19-50min，隨后在濃度為30-90mM N-羥基丁二酰亞胺的磷酸緩沖鹽溶液中浸泡10-50min；浸入含0.1-3mg/mL納米抗體的磷酸緩沖鹽溶液中浸泡10-60min，然后浸入0.2-2mg/mL的牛血清白蛋白溶液中溫育0.5-2h，再用磷酸緩沖鹽溶液清洗以去除未結合的蛋白。

2.如權利要求1所述的一種S形光纖錐免疫傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所用的光纖為單模光纖。

3.如權利要求1所述的一種S形光纖錐免疫傳感器的制備方法，其特征在于，所使用單模光纖的纖芯直徑為9μm，包層直徑為125μm，涂覆層直徑為250μm。

4.如權利要求1所述的一種S形光纖錐免疫傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(1)中所制備的S形光纖錐結構，其錐腰直徑為30-60μm，錐長為600-900μm。

5.如權利要求1所述的一種S形光纖錐免疫傳感器的制備方法，其特征在于，所使用氧化石墨烯溶液濃度為2mg/mL，氧化石墨烯納米片直徑大于500nm。

6.如權利要求1所述的一種S形光纖錐免疫傳感器的制備方法，其特征在于，所使用金納米粒子是用檸檬酸還原法制備得到，其直徑為10-60nm。

7.如權利要求1所述的一種S形光纖錐免疫傳感器的制備方法，其特征在于，所使用的納米抗體為來源于羊駝的納米抗體，對應檢測的抗原是癌胚抗原蛋白。

8.一種S形光纖錐免疫傳感器，其特征在于，由權利要求1-7中任意一項所述的方法制備得到。