[發(fā)明專利]微肽及其用于調(diào)節(jié)基因表達(dá)的用途

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110730785.8
• 申請(qǐng)日: 2014-10-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113430295A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J-P·庫(kù)姆比爾;D·勞萊塞爾古斯;G·拜卡德;F·帕萊;S·普拉扎;J·卡瓦伊勒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 保爾·薩巴梯埃圖盧茲第三大學(xué);國(guó)家科研中心
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12Q1/6888;C07K7/06;C07K7/08;C12N15/11
• 代理公司: 中國(guó)貿(mào)促會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 11038
• 代理人: 鄭天松

1.用于檢測(cè)、鑒定和使用由包含在微小RNA的初級(jí)轉(zhuǎn)錄物序列中的核苷酸序列所編碼的微肽miPEP的方法，

其中所述檢測(cè)和鑒定如下實(shí)施：

(a)檢測(cè)包含在所述微小RNA的初級(jí)轉(zhuǎn)錄物序列中的具有12～303個(gè)核苷酸的開(kāi)放閱讀框，然后

(b)在下列之間進(jìn)行比較：

·在由相對(duì)于所述開(kāi)放閱讀框的核苷酸序列而言相同或簡(jiǎn)并的核苷酸序列所編碼的肽存在下，所述微小RNA在表達(dá)所述微小RNA的指定真核細(xì)胞中的積累，其中所述肽不依賴于所述微小RNA的初級(jí)轉(zhuǎn)錄物的轉(zhuǎn)錄而存在于所述細(xì)胞中，和

·在所述肽不存在下，所述微小RNA在與上述表達(dá)所述微小RNA的指定真核細(xì)胞相同類型的真核細(xì)胞中的積累，

其中，相對(duì)于所述微小RNA在所述肽不存在下的積累而言所述微小RNA在所述肽存在下的積累的調(diào)節(jié)表明了由所述開(kāi)放閱讀框所編碼的微肽的存在，且

其中所述使用是：

(c)通過(guò)將所述miPEP或編碼所述miPEP的多核苷酸引入到真核細(xì)胞來(lái)使用所述miPEP調(diào)節(jié)能夠表達(dá)所述微小RNA的所述真核細(xì)胞中所述微小RNA的積累。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中所述微小RNA的積累的調(diào)節(jié)為所述微小RNA的積累的減少或增加。

3.根據(jù)權(quán)利要求2的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中所述微小RNA的積累的調(diào)節(jié)為所述微小RNA的積累的增加。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3之任一項(xiàng)的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中步驟(a)的所述開(kāi)放閱讀框被包含在所述微小RNA的所述初級(jí)轉(zhuǎn)錄物的5’或3’部分中。

5.根據(jù)權(quán)利要求5的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中步驟(a)的所述開(kāi)放閱讀框被包含在所述微小RNA的所述初級(jí)轉(zhuǎn)錄物的5’部分中。

6.根據(jù)權(quán)利要求1～3之任一項(xiàng)的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中所述微小RNA存在于野生型植物細(xì)胞中或存在于野生型動(dòng)物細(xì)胞中，并且其中在步驟(b)中所使用的所述真核細(xì)胞為植物細(xì)胞，或者為動(dòng)物細(xì)胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求7的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中在步驟(b)中所使用的所述真核細(xì)胞為十字花科植物、豆科植物或茄科植物的植物細(xì)胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求7的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中在步驟(b)中所使用的所述真核細(xì)胞為從由人細(xì)胞或果蠅細(xì)胞組成的組中選擇的動(dòng)物細(xì)胞。

9.根據(jù)權(quán)利要求1～3之任一項(xiàng)的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中在步驟(b)中所使用的所述真核細(xì)胞之中，所述微小RNA是內(nèi)源來(lái)源的。

10.根據(jù)權(quán)利要求1～3之任一項(xiàng)的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中在步驟(b)中所使用的所述真核細(xì)胞之中，

所述微小RNA是外源來(lái)源的，

所述真核細(xì)胞包含允許所述微小RNA表達(dá)的載體。

11.根據(jù)權(quán)利要求1～3之任一項(xiàng)的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中所述微小RNA的積累通過(guò)使用定量RT-PCR、Northern印跡、DNA芯片或RNA芯片來(lái)進(jìn)行測(cè)定。

12.根據(jù)權(quán)利要求1～3之任一項(xiàng)的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中在步驟(c)中使用之前，將所述miPEP或編碼所述miPEP的多核苷酸與賦形劑、稀釋劑或溶劑混合。

13.根據(jù)權(quán)利要求12的用于檢測(cè)、鑒定和使用miPEP的方法，其中所述賦形劑、稀釋劑或溶劑包含選自下列的組分：乙腈，乙酸，乙腈和乙酸的混合物，水和乙腈的混合物，水和乙酸的混合物，及水、乙腈和乙酸的混合物。