[發明專利]一種基于銀耳孢子發酵液提取多糖的方法

在審

• 申請號: 202110721695.2
• 申請日: 2021-06-28
• 公開（公告）號: CN113583145A
• 公開（公告）日: 2021-11-02
• 發明（設計）人: 齊寧;牛貴清;董新彬
• 申請（專利權）人: 山東安華生物醫藥股份有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京盛凡佳華專利代理事務所(普通合伙) 11947
• 代理人: 張曉東

本發明公開了一種基于銀耳孢子發酵液提取多糖的方法，屬于多糖制備及應用技術領域，該基于銀耳孢子發酵液提取多糖的方法，包括以下步驟：步驟一、原料準備，對銀耳孢子發酵液進行過濾，隨后使用研磨設備進行初步的研磨破碎，混合緩沖液，加熱至35攝氏度，混合纖維素酶溶液，酶解后，冷卻待用。該基于銀耳孢子發酵液提取多糖的方法，通過對銀耳孢子的粉碎、提取，可以最大程度利用銀耳的有效充分，保證提取效率，纖維酶，可以實現對大分子的多聚糖進行水解，保證對多糖的提取含量提升，保證充足利用原材料，通過對銀耳孢子提取通過預先固體物生產處理，使得無機鹽提前析出，隨后采用水為溶劑，將無機鹽溶解，降低了制備成本。

技術領域

本發明涉及多糖制備及應用領域，具體為一種基于銀耳孢子發酵液提取多糖的方法。

背景技術

銀耳多糖是銀耳的主要活性成分，包括酸性多糖、中性多糖、中性雜多糖、酸性低聚糖、胞壁多糖和胞外多糖等，具有強心、延緩衰老、抗血栓、抗腫瘤、提高免疫力以及祛除黃褐斑等功效，在食品、保健品及化妝品領域中應用廣泛，大分子量的銀耳多糖具有良好的保濕能力和優越的成膜性，并具有抗氧化、抗敏消炎作用，但是存在溶解度低、不易被皮膚吸收和在配方中應用會帶來黏膩感的缺點，在化妝品中應用存在一定的缺陷，而較低分子量的銀耳多糖，溶解度高，容易被皮膚吸收且具備良好的保濕能力，給皮膚提供深層保濕的作用，故低分子量的銀耳多糖更適合應用于化妝品領域。

孢子(spore)是脫離親本后能直接或間接發育成新個體的生殖細胞，它是有絲分裂或減數分裂的產物；多數為單倍體，少數為二倍體，孢子一般為單細胞的，也可能是多細胞的繁殖體，由于它的性狀不同，發生過程和結構的差異，形成了孢子的多樣性。

目前對于從銀耳子實體或孢子中提取銀耳多糖的方法主要有熱水浸取法、溶劑提取法、酶溶提取法等，這些方法是通過破壞銀耳細胞而使胞內多糖溶出，但是銀耳孢子中不僅僅含有多糖，還含有蛋白質和無機鹽，在實際的制備過程中，需要花費大量的時間和試劑進行蛋白質的祛除，且依然會產生大量的試劑殘留，其次是在后續的制備過程中，無機鹽難以提前祛除，造成了多糖的雜質含量過多，實際制備成本較高的問題。

發明內容

本發明提供的發明目的在于提供一種基于銀耳孢子發酵液提取多糖的方法。通過本發明一種基于銀耳孢子發酵液提取多糖的方法，對于銀耳多糖的制備效率，隨后采用反復采用聚乙二醇和乙醇溶解、醇沉提取物，通過在生產過程中使用的聚乙二醇和乙醇進行回收再利用，避免產生原料的浪費。

為了實現上述效果，本發明提供如下技術方案：一種基于銀耳孢子發酵液提取多糖的方法，包括以下步驟：

步驟一、原料準備，對銀耳孢子發酵液進行過濾，隨后使用研磨設備進行初步的研磨破碎，混合緩沖液，加熱至35攝氏度，混合纖維素酶溶液，酶解后，冷卻待用。

步驟二、粗分離，酶解液，取出加熱、離心，隨后進行凍干處理，獲取固體產物。

步驟三、提純，固體產物與無水乙醇和聚乙二醇混合浸泡，離心后取上清液，蒸發為濃縮液。

步驟四、制備多糖，再次加入無水乙醇，醇沉24小時、通過中空蒸發器進行凍干粉制備即可。

進一步的，包括以下步驟：根據步驟一中的操作步驟，所述發酵液進行過濾，其過濾直徑為銀耳孢子直徑。

進一步的，包括以下步驟：根據步驟一中的操作步驟，所述緩沖液以稀鹽酸溶液制備，所述稀鹽酸溶液的濃度為0.4-0.8mol/L，所述緩沖液的PH值為4-5。

進一步的，包括以下步驟：根據步驟二中的操作步驟，所述酶解液的加熱溫度為40-60攝氏度。

進一步的，包括以下步驟：根據步驟二中的操作步驟，所述固體產物為蛋白質和多糖的混合物。

進一步的，包括以下步驟：根據步驟三中的操作步驟，所述無水乙醇和聚乙二醇混合浸泡時間需要達到24小時以上，所述濃縮液為原體積的十分之一。