[發明專利]黃瓜雌性系性狀相關SCAR標記及其應用有效
| 申請號： | 202110721114.5 | 申請日： | 2021-06-28 |
| 公開（公告）號： | CN113249514B | 公開（公告）日： | 2022-10-14 |
| 發明（設計）人： | 楊宗輝;曹齊衛;孟昭娟;李利斌;陳偉;高天 | 申請（專利權）人： | 山東省農業科學院蔬菜花卉研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/04 |
| 代理公司： | 濟南誠智商標專利事務所有限公司 37105 | 代理人： | 房一粟 |
| 地址： | 250100 山東*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 黃瓜 雌性 性狀 相關 scar 標記 及其 應用 | ||
1.一種黃瓜雌性系性狀相關SCAR標記篩選黃瓜雌性系材料的方法，其特征在于，包括如下步驟：
1）提取待測黃瓜的基因組DNA；
2）以待測黃瓜的基因組DNA為模板，利用標記引物進行PCR擴增反應；所述的標記引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；
3）檢測擴增產物，標記擴增結果判斷待鑒定品種，具有356bp條帶的材料為雌性系材料，標記擴增無條帶的材料為非雌性系材料；所述的SCAR標記的序列如SEQ ID NO.3所示。
2.如權利要求1所述的篩選黃瓜雌性系材料的方法，其特征在于，步驟2）中所述的PCR擴增反應的反應體系為20lμl，具體如下：
10ng/μl模板DNA 2μl，10pmol/μl上游引物1μl，10pmol/μl下游引物1μl，2X M5 HiPerplus taqHiFi PCR mix 10μl，超純水6μl。
3.如權利要求1所述的篩選黃瓜雌性系材料的方法，其特征在于，步驟2）中所述的PCR擴增反應的擴增程序為：
95℃預變性1min；然后95℃變性15s，55℃退火15s，45s，72℃延伸30s，共計30個循環；最后72℃延伸10min。
4.如權利要求1所述的黃瓜雌性系性狀相關SCAR標記的引物在篩選黃瓜雌性系材料和回交轉育的輔助選擇方面的應用。
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