[發(fā)明專利]蛋鴨環(huán)狀RNA circ_2136及其檢測試劑、方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110720701.2
• 申請日: 2021-06-28
• 公開（公告）號(hào): CN113528519B
• 公開（公告）日: 2022-04-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張昊;魏文焯;梁振華;吳艷;鄭超;皮勁松;杜金平;潘愛鑾;申杰;孫靜;黃濤;蒲躍進(jìn)
• 申請（專利權(quán)）人: 湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;A61K31/7105;A61P1/00;C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 武漢智嘉聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 42231
• 代理人: 萬青青

1.一種蛋鴨環(huán)狀RNA circ_2136，其特征在于，所述蛋鴨環(huán)狀RNA circ_2136對(duì)應(yīng)的cDNA的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO: 1所示。

2.一種載體，其特征在于，所述載體中包含如權(quán)利要求1所述的蛋鴨環(huán)狀RNA circ_2136。

3.一種細(xì)胞，其特征在于，所述細(xì)胞中包含如權(quán)利要求2所述的載體。

4.如權(quán)利要求1所述的蛋鴨環(huán)狀RNA circ_2136，或如權(quán)利要求2所述的載體，或如權(quán)利要求3所述的細(xì)胞在制備調(diào)控腸道屏障功能試劑中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述蛋鴨環(huán)狀RNA circ_2136，或所述載體，或所述細(xì)胞通過調(diào)控小腸上皮細(xì)胞增殖，進(jìn)而調(diào)控腸道屏障功能。

6.如權(quán)利要求1所述的蛋鴨環(huán)狀RNA circ_2136的檢測引物對(duì)，其特征在于，所述引物對(duì)包括：上游引物PF1和下游引物PR1，所述上游引物PF1的核苷酸序列如SEQ ID NO: 2所示，所述下游引物PR1的核苷酸序列如SEQ ID NO: 3所示。

7.一種如權(quán)利要求1所述的蛋鴨環(huán)狀RNA circ_2136的檢測試劑盒，其特征在于，所述檢測試劑盒中包括如權(quán)利要求6所述的檢測引物對(duì)。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述檢測試劑盒中還包括RNA提取試劑、逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系和熒光定量PCR反應(yīng)體系。

9.如權(quán)利要求7-8任一所述的檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、提取待檢測樣品中的RNA，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA；

步驟2、利用如權(quán)利要求6中所述的檢測引物對(duì)，對(duì)待檢測樣品的cDNA進(jìn)行熒光定量PCR擴(kuò)增并進(jìn)行相對(duì)定量分析，判斷待測樣品中是否存在所述蛋鴨環(huán)狀RNA circ_2136及其表達(dá)量。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的使用方法，其特征在于，所述方法中還包括：利用如權(quán)利要求6中所述的檢測引物對(duì)，對(duì)待檢測樣品的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增，然后對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序，獲得接頭序列的堿基信息，以驗(yàn)證擴(kuò)增產(chǎn)物是否為成環(huán)的RNA。