[發明專利]一種適用于甘草膏赭曲霉毒素A的快速測定方法

在審

• 申請號: 202110717020.0
• 申請日: 2021-06-28
• 公開（公告）號: CN113804803A
• 公開（公告）日: 2021-12-17
• 發明（設計）人: 鞏志國;房芳;蘇敏;王靜靜;何璐;齊冬琴;姚偉琴;李曉巖;彭靜怡
• 申請（專利權）人: 烏魯木齊海關技術中心
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/08;G01N30/14;G01N30/74;G01N1/38
• 代理公司: 西安鼎邁知識產權代理事務所(普通合伙) 61263
• 代理人: 馮新飛

1.一種適用于甘草膏中赭曲霉毒素A的快速測定方法，其特征在于，該測定方法具體包括如下步驟：

(1)稱取樣品1.0g，加入20mL的NaHCO₃水溶液和乙腈混合溶液，60℃下超聲30min，第一次離心后取上清液，加入鹽酸調節pH值至2-3時，加入三氯甲烷后渦旋混勻萃取；第二次離心分離后取三氯甲烷層，重復萃取一次，合并三氯甲烷約30mL，旋轉蒸發至1-2mL溶液，加入20mL的NaHCO₃溶液和乙腈混合的提取液，混合后第三次離心分離，取4mL上清液待凈化；

(2)將步驟(1)上清液加入PBST溶液稀釋，渦旋混勻后過免疫親和柱凈化，依次用5mLPBST和5mL水淋洗免疫親和柱后擠干，用2.5mL的濃度為2％的乙酸甲醇洗脫并收集試管中；

(3)將步驟(2)中收集試管中的流出液于40℃下氮氣吹干，用0.5mL混合溶劑溶解，渦旋后過PTFE濾膜；

(4)配制標準工作溶液制作標準曲線，以外標法定量；

(5)過膜后溶液上液相色譜熒光檢測器法檢測。

2.如權利要求1所述的一種適用于甘草膏中赭曲霉毒素A的快速測定方法，其特征在于，所述步驟(1)中NaHCO₃水溶液和乙腈的體積比為60：40，NaHCO₃水溶液的濃度為30g/L，鹽酸的濃度為5mol/L；用鹽酸調節pH值至2-3時加入三氯甲烷后渦旋混勻萃取兩次合并，旋轉蒸發至1-2mL溶液，用20mL的NaHCO₃溶液和乙腈混合的提取液來反萃取。

3.如權利要求1所述的一種適用于甘草膏赭曲霉毒素A的快速測定方法，其特征在于，所述步驟(2)中PBST溶液為氯化鈉8.0g、磷酸氫二鈉1.2g、磷酸二氫鉀0.2g、氯化鉀0.2g，用水溶解，調節PH至7.0，加入吐溫-201mL，加水定容至1L；用5mLPBST和5mL水淋洗免疫親和柱，用2.5mL的濃度為2％的乙酸甲醇洗脫并收集試管中。

4.如權利要求1所述的一種適用于甘草膏赭曲霉毒素A的快速測定方法，其特征在于，所述步驟(5)采用液相色譜法檢測的條件為：ZORBAX SB-C18柱(4.6*150mm)色譜柱；流動相：A:濃度為2％的乙酸水溶液，C:濃度為2％的乙酸乙腈溶液。

5.如權利要求1所述的適用于甘草膏中赭曲霉毒素A的快速測定方法的應用。