[發明專利]一種腎上腺素的高靈敏熒光檢測方法及試劑盒在審
| 申請號: | 202110703390.9 | 申請日: | 2021-06-24 |
| 公開(公告)號: | CN113514437A | 公開(公告)日: | 2021-10-19 |
| 發明(設計)人: | 劉玉菲;安佳;胡永琴;張國秀;楊達;代付康 | 申請(專利權)人: | 重慶大學 |
| 主分類號: | G01N21/64 | 分類號: | G01N21/64 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 400044 *** | 國省代碼: | 重慶;50 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 腎上腺素 靈敏 熒光 檢測 方法 試劑盒 | ||
本發明公開了一種腎上腺素的高靈敏熒光檢測方法,包括以下步驟:S1:將乙二胺添加至緩沖液中,獲得第一混合液;S2:在所述第一混合液中,加入腎上腺素溶液得到第二混合液;S3:加熱使所述第二混合液反應后得到第三混合液;S4:通過光譜儀收集所述第三混合液在330nm處的發射峰強度,并通過發射峰強度計算腎上腺素的濃度。另一方面,本發明還提出一種用于腎上腺素的高靈敏熒光檢測的試劑盒:包括緩沖液、乙二胺,所述試劑盒通過所述腎上腺素的高靈敏熒光檢測方法實現對腎上腺素的檢測。
技術領域
本申請涉及化學檢測領域,尤其涉及一種腎上腺素的高靈敏熒光檢測方法及試劑盒。
背景技術
腎上腺素(adrenaline,Ep)是由人體分泌出的一種激素和神經遞質,由腎上腺釋放,腎上腺素作為重要的神經遞質和激素,由于其強大的生理特性和藥理功能,已被研究多年。相關藥物常用于高血壓、器質性心臟病、支氣管哮喘、心肌梗死和心臟手術。尿和血漿中Ep異常濃度水平已被用于診斷和評價神經、精神和心血管疾病的治療和藥理作用。當前,已經有許多檢測生物樣品中腎上腺素的方法被提出,例如毛細管電色譜、HPLC-MS、UPLC-MS/MS和親水相互作用色譜與電化學檢測。然而,這些方法需要昂貴的儀器、專業和費力的操作。因此,迫切需要開發能夠同時檢測腎上腺素的簡單、選擇性和靈敏的方法。
發明內容
基于以上問題,本發明提出了一種腎上腺素的高靈敏熒光檢測方法,包括以下步驟:
S1:將乙二胺添加至緩沖液中,獲得第一混合液;
S2:在所述第一混合液中,加入腎上腺素溶液得到第二混合液;
S3:加熱使所述第二混合液反應后得到第三混合液;
S4:通過光譜儀收集所述第三混合液在330nm處的發射峰強度,并通過發射峰強度計算腎上腺素的濃度。
在其中一個實施例中,所述緩沖液選自伯瑞坦-羅賓森、磷酸鹽緩沖溶液、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖溶液中的任意一種,所述緩沖液的pH值為7.0~12.0。
在其中一個實施例中,所述第一混合液中乙二胺的濃度為1M-1.5M。
在其中一個實施例中,步驟S3的加熱溫度為30℃-60℃。
在其中一個實施例中,步驟S3的加熱時間不小于8分鐘。
在其中一個實施例中,形成所述第一混合液之前,還包括步驟S1a:向所述緩沖液中加入參比物。
在其中一個實施例中,所述參比物為熒光金納米團簇、熒光碳點、熒光硅量子點中的至少一種,所述參比物在紫外光照下顯藍色。
在其中一個實施例中,所述參比物在反應體系中的濃度為0.01mg/mL-0.4mg/mL。
這種檢測方法簡單高效,僅通過乙二胺在特定pH值緩沖液中形成的混合液即可實現對腎上腺素的快速、高靈敏檢測,成本低,效率高,具有廣闊的應用前景。
另一方面,本發明還提出一種用于腎上腺素的高靈敏熒光檢測的試劑盒:包括:緩沖液、乙二胺,所述試劑盒通過權利要求1所述的腎上腺素的高靈敏熒光檢測方法實現對腎上腺素的檢測。
在其中一個實施例中,還包括參比物,所述參比物為熒光金納米團簇、熒光碳點、熒光硅量子點中的至少一種,所述參比物在紫外光照下顯藍色。
這種試劑盒僅通過乙二胺和緩沖液,再結合常用的光譜儀設備,即可實現對腎上腺素的快速、高靈敏檢測,成本低,效率高,具有廣闊的應用前景。
附圖說明
下面結合附圖對本發明的具體實施方式作進一步詳細的說明:
圖1示出了對腎上腺素最佳檢測條件(a)不同pH值,(b)EDA濃度,(c)溫度和(d)反應時間;
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