[發明專利]特異性結合糖基化CEACAM5的抗體

在審

• 申請號: 202110697514.7
• 申請日: 2021-06-23
• 公開（公告）號: CN115505043A
• 公開（公告）日: 2022-12-23
• 發明（設計）人: 牟男;于躍;杜靚;袁紀軍
• 申請（專利權）人: 上海吉倍生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/30
• 分類號: C07K16/30;A61K39/395;A61K45/06;A61K47/68;A61P35/00
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 李程達

本申請提供了特異性結合CEACAM5的抗體，其人源化抗體的制備及應用。

技術領域

本發明涉及抗體。更具體地，本申請涉及與糖基化CEACAM5特異性結合的單克隆抗體，其人源化抗體的制備及應用。

背景技術

1960s年代，Gold和Freedman首次于人結腸癌組織提取物中發現CEA抗原(CEACAM5)，并隨后在結直腸癌等癌癥患者外周血中檢測到游離的CEA抗原。CEA抗原廣泛參與細胞粘附、細胞分化、細胞增殖及細胞生存。CEA抗原廣泛高表達于消化道癌癥，如結直腸、食管癌、胃癌等，其作為腫瘤標志物使用已有數十年的歷史。

CEACAM5(CD66e,Carcinoembryonic antigen related cell adhesionmolecule5)，是一種癌胚抗原，其屬于CEA家族。CEA家族包含12個基因，均位于染色體19q13；CEACAM5是CEA家族中分子量最大的基因，表達于細胞膜(GPI錨定)并會脫落進入外周血中成為游離CEA；其由702個氨基酸組成(N-A1-B1-A2-B2-A3-B3結構域串聯)，分子量約77KDa；重組表達或結直腸癌患者腹水中純化的CEACAM5蛋白其分子量約為180KDa，表明在細胞中CEACAM5高度糖基化。

CEA家族抗原以跨膜、GPI錨定和分泌三種形式存在，其胞外區由免疫球蛋白結構域組成。胞外區包含N端結構域、A1-3結構域、B1-3結構域串聯形成。CEACAM1、CEACAM5、CEACAM6、CEACAM7、CEACAM8、CEACAM18、CEACAM20、CEACAM21含N端及AB結構域；CEACAM3、CEACAM4、CEACAM19僅包含N端結構域；CEACAM16為分泌蛋白。CEACAM家族蛋白，如CEACAM1、CEACAM3、CEACAM5、CEACAM6、CEACAM8具有高度同源性，其組織分布不同，如CEACAM1主要分布于尿路上皮及腸道上皮；CEACAM6主要分布于肺泡及膽管、CEACAM8主要分布于骨髓及造血系統。

CEACAM5廣泛高表達于眾多癌癥中，如消化道癌癥(結直腸、胃癌、胰腺癌、食管癌)、肺癌、乳腺癌等，是理想的腫瘤相關抗原靶點(TAA，Tumor Associated Antigen)。靶向CEACAM5藥物開發主要集中在抗體發現領域，CEA家族序列同源度較高，因此篩選特異性靶向CEACAM5抗體可能降低臨床使用中副作用，從而提高治療窗口，提高藥效。

發明內容

本發明提供了一種特異性結合CEACAM5的人源化抗體，可應用于CEACAM5高表達腫瘤的治療。

本發明的一個方面提供了針對CEACAM5的單克隆抗體抗體或其抗原結合片段，所述抗體或其抗原結合片段特異性結合CEACAM5的N-A1-B1結構域而不結合A2-B2和A3-B3結構域。

在具體實施方案中，本發明的單克隆抗體包含重鏈可變區及輕鏈可變區，其中：

a.所述重鏈可變區包含：由SEQ ID NO:1所示的CDR-H1或與其相比具有一個或幾個氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個，2個或3個氨基酸的置換、缺失或添加)的序列、由SEQ ID NO:2所示的CDR-H2或與其相比具有一個或幾個氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個，2個或3個氨基酸的置換、缺失或添加)的序列，和由SEQ ID NO:3所示的CDR-H3或與其相比具有一個或幾個氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個，2個或3個氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；同時所述輕鏈可變區包含：由SEQ ID NO:4所示的CDR-L1或與其相比具有一個或幾個氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個，2個或3個氨基酸的置換、缺失或添加)的序列、由SEQ ID NO:5所示的CDR-L2或與其相比具有一個或幾個氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個，2個或3個氨基酸的置換、缺失或添加)的序列，和由SEQ ID NO:6所示的CDR-L3或與其相比具有一個或幾個氨基酸的置換、缺失或添加(例如1個，2個或3個氨基酸的置換、缺失或添加)的序列；或