[發明專利]一種檢測藻類食品及其生產原料中微囊藻毒素的方法

在審

• 申請號: 202110696858.6
• 申請日: 2021-06-23
• 公開（公告）號: CN113447581A
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 李莉;李碩;王海燕;孫磊;路勇
• 申請（專利權）人: 中國食品藥品檢定研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 劉鑫;姚亮

本發明提供了一種檢測藻類食品及其生產原料中微囊藻毒素的方法。將待檢測的樣品與提取溶劑混合，采用渦旋振蕩提取，離心后收集樣品提取液；采用凈化管對樣品提取液進行凈化處理，過濾后得到待測樣品檢測液；其中，凈化管中裝填有硫酸鎂、N?丙基乙二胺吸附劑、C₁₈和中性氧化鋁；采用超高效液相色譜?三重四級桿質譜儀對待測樣品檢測液進行檢測，實現8種微囊藻毒素的定性定量分析。該方法具有分析時間短，定性、定量檢測結果穩定可靠等特點。

技術領域

本發明屬于食品安全檢測技術領域，涉及一種檢測藻類食品及其生產原料中微囊藻毒素的方法。

背景技術

藻類食品及其原料含有豐富的蛋白質、氨基酸、多糖、膳食纖維、不飽和脂肪酸、礦物元素及多種生理活性物質。近年來，以螺旋藻為代表的藻類食品，作為具有保健功能的新型食品日益受到消費者的關注和青睞。目前，我國已批準的藻類保健食品原料包括螺旋藻、小球藻、鹽藻、雨生紅球藻等。螺旋藻包括鈍頂螺旋藻(Arthrospira platensis)和極大螺旋藻(Arthrospira maxima)，是藻類食品使用最多也是最重要的原料之一。此外，蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidesa)于2012年被批準為新資源食品，成為新興的熱門食品原料。

螺旋藻的養殖水域可能存在共生的其他藻類如微囊藻、魚腥藻等，可產生對人體有害的微囊藻毒素。微囊藻毒素具有明顯的肝細胞毒性，具有胚胎發育和生殖毒性，可能導致胚胎畸形、發育遲緩甚至死亡；此外對神經系統、免疫系統也有一定的負面影響，包括：誘導細胞凋亡、氧化應激、引起線粒體功能改變等。養殖淡水富營養化而發生水華則會導致螺旋藻受到微囊藻毒素的污染。由于微囊藻毒素有較好的化學穩定性，在螺旋藻加工生產過程中，如果質量控制不嚴格，則很有可能將微囊藻毒素傳遞至終產品。消費者服用了被微囊藻毒素污染的螺旋藻類食品，可能導致對身體產生潛在危害。早在2002年，中國疾病預防控制中心有關研究人員就螺旋藻類保健食品生產原料及產品中微囊藻毒素污染狀況進行調查后發現：螺旋藻生產過程和市售產品中均有不同程度的微囊藻毒素污染。該研究認為服用螺旋藻而攝入微囊藻毒素對人類健康可能造成影響，并建議制定符合我國特點的藻類保健食品中微囊藻毒素限量標準。截至目前為止，我國尚未出臺相關產品的微囊藻毒素限量標準。檢測標準方面，中華人民共和國國家標準GB/T 16919-1997《食用螺旋藻粉》中僅有常規理化和微生物檢驗項目，未規定微囊藻毒素等藻毒素的檢驗項目。GB 5009.273-2016《食品安全國家標準水產品中微囊藻毒素的測定》適用于魚、蝦、河蚌等水產品中微囊藻毒素的測定，未將藻類食品及其原料納入其適用范圍，且該標準僅涉及微囊藻毒素-LR，-RR和-YR的檢測，未能覆蓋可能造成污染的其他微囊藻毒素種類。市場監管總局關于發布《輔酶Q10等五種保健食品原料備案產品劑型及技術要求》的公告(2021年第4號)《保健食品原料目錄螺旋藻》備案產品技術要求中，除包括理化指標和微生物指標外，添加了“β-胡蘿卜素”和“藻藍蛋白”兩個指標作為標志性成分，未將微囊藻毒素納入檢測范圍也未規定其限量。

目前測定微囊藻毒素的分析方法有高效液相色譜法(HPLC)、毛細管電泳法(CE)、液相色譜-質譜法(LC-MS)等方法，主要集中在水質監測等環境工業領域以及飲用水和水產品中微囊藻毒素檢測。有關藻類食品及其原料中微囊藻毒素污染情況的研究較少，毒素類型覆蓋面較窄，大多數方法采用傳統固相萃取柱對樣品進行凈化，樣品制備效率較低。為有效開展藻類食品及其原料中的安全風險評估，準確識別微囊藻毒素污染物的種類和污染程度，有必要建立藻類食品及其原料中微囊藻毒素含量的測定方法。

發明內容

基于現有技術存在的缺陷，本發明的目的在于提供一種檢測藻類食品及其生產原料中微囊藻毒素的方法，該檢測方法實現了藻粉、藻片劑、藻顆粒劑、藻膠囊等藻類食品及其生產原料中8種微囊藻毒素的檢測，具有分析時間短，定性、定量檢測結果穩定可靠等特點。

本發明的目的通過以下技術手段得以實現：

本發明提供一種檢測藻類食品及其生產原料中微囊藻毒素的方法，包括以下步驟：