[發明專利]一種枯草芽孢桿菌菌劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202110696249.0
• 申請日: 2021-06-23
• 公開（公告）號: CN113604377A
• 公開（公告）日: 2021-11-05
• 發明（設計）人: 郭中信;耿進華;尤龍;王延剛
• 申請（專利權）人: 山東京青農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P3/00;C12R1/125
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

1.一種枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，所述的菌劑由枯草芽孢桿菌經種子活化、種子培養、發酵培養后制成的菌劑，所述的枯草芽孢桿菌為JQ-0101D，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院，保藏登記號為CGMCC No.22039。

2.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，所述的菌劑優選為液體菌劑。

3.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，該菌劑的制備方法包括如下步驟：

a .菌種活化：將低溫保存的枯草芽孢桿菌菌株接種于固體培養基上，于35-38℃培養34-38h，挑取單菌落轉接到斜面培養基上，于35-38℃培養16-24h，用無菌水洗下培養基表面菌體作為接種液；

b .一級種子液制備：按照5％-10％的接種量向種子培養基中接入步驟a制備的接種液，轉速200-260rpm，溫度35-38℃，搖床培養16-24h，作為一級種子液； c.二級種子液制備：按照0.5％-3％的接種量向種子培養基中接入步驟b制備的一級種子液，通氣量為0.4-1.5vvm，攪拌速度為180-260rpm，培養時間為18-24h，作為二級種子液；

d .發酵培養：按照5％-10％的接種量向發酵培養基中接入步驟c制備的二級種子液，通氣量為0.4-1.5vvm，攪拌速度為180rpm-260rpm，培養時間為24h-30h，得到發酵液；

e .將上述發酵液通過水洗和分子篩濃縮，得到枯草芽孢桿菌液體菌劑。

4.根據權利要求3所述的枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，所述步驟b和步驟c中的種子培養基的組成成分及其重量百分比為：葡萄糖1-2％、蛋白胨1-1.5％、酵母粉0.6-1％、牛肉膏0.5-0.7％、氯化鈉0.5％，其余為水。

5.根據權利要求3所述的枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，所述步驟d中的發酵培養基的組成成分及其重量百分比為：葡萄糖3-5％、蛋白胨0.5-1.5％、酵母粉0.03-0.08％、蛋白胨0.1-0 .3％、豆粕粉0.5-1 .5％、硫酸鎂0.01-0.05％、硫酸錳0.01-0 .05％，其余為水。

6.根據權利要求3所述的枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，將步驟d所述發酵液進行噴霧干燥，進口溫度150-200℃，出口溫度50-90℃，加入噴霧載體可溶性淀粉，得到枯草芽孢桿菌粉劑。

7.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，該菌劑應用于防治植物真菌病害，所述的真菌病害具體為根腐病，所述的植物具體為五加科人參屬植物。

8.根據權利要求7所述的枯草芽孢桿菌菌劑，其特征在于，所述的五加科人參屬植物具體為人參、田七和西洋參。