[發明專利]一種生物樣品中前列腺素類物質的檢測方法

有效

• 申請號: 202110692340.5
• 申請日: 2021-06-22
• 公開（公告）號: CN113358791B
• 公開（公告）日: 2022-09-30
• 發明（設計）人: 顧景凱;孫冬;孟祥駿;宋詩文
• 申請（專利權）人: 北京現代藥物代謝研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 北京國林貿知識產權代理有限公司 11001
• 代理人: 李瑾;李連生

1.一種生物樣品中前列腺素類物質的檢測方法，其特征在于：先通過化學衍生化方法將生物樣品中前列腺素類物質等量轉化成胺甲基芳磺酸衍生物，再通過液相色譜-質譜聯機檢測；檢測時選擇芳磺酸衍生物負離子[M-H]^-和其高特異性碎片離子[M-H₂O-C_15Residue]^-或者選擇芳磺酸衍生物負離子[M-H]^-和報告離子作為定量離子對進行定量；所述M指芳磺酸衍生物；所述C_15Residue指系列前列腺素C₁₄-C₁₅之間碳碳單鍵斷裂后C₁₅一側殘基；所述報告離子指前列腺素芳磺酸衍生物裂解時產生的芳磺酸碎片離子；

胺甲基芳磺酸衍生化試劑通式為H₂N-CH₂-Ar-SO₃H，其中Ar為苯環或稠環芳烴；所述稠環芳烴包括芴、苊、萘、蒽、熒蒽、苯并蒽、菲、芘、苯并芘。

2.根據權利要求1所述的生物樣品中前列腺素類物質的檢測方法，其特征在于：胺甲基芳磺酸衍生化試劑為4-(胺甲基)苯磺酸或5-(胺甲基)萘-2-磺酸。

3.根據權利要求2所述的生物樣品中前列腺素類物質的檢測方法，其特征在于：對于4-(胺甲基)苯磺酸衍生的前列腺素類物質選擇的報告離子為[C₇H₆NO₃S]^-或[C₇H₆O₃S]^·-；對于5-(胺甲基)萘-2-磺酸衍生的前列腺素類物質選擇的報告離子為[C₁₁H₈NO₃S]^-或[C₁₁H₈O₃S]^·-。

4.根據權利要求1所述的生物樣品中前列腺素類物質的檢測方法，其特征在于：采用化學衍生化方法對生物樣品中前列腺素類待測物進行衍生化處理時，衍生化條件為典型肽偶聯反應條件：有機堿為N,N-二異丙基乙基胺或三乙胺；偶聯試劑為HATU或HBTU；溶劑為乙腈水混合液，室溫反應。

5.根據權利要求1所述的生物樣品中前列腺素類物質的檢測方法，其特征在于：色譜條件為：高效液相色譜；反相色譜柱；乙腈/水流動相；梯度洗脫；質譜條件為：多重四極桿型串聯質譜儀，ESI離子化源，選擇性加裝離子淌度；負離子檢測模式。

6.根據權利要求1所述的生物樣品中前列腺素類物質的檢測方法，其特征在于：所述的生物樣品為血漿、組織液、尿液。

7.根據權利要求1所述的生物樣品中前列腺素類物質的檢測方法，其特征在于：所述前列腺素類物質包括系列前列腺素及前列腺素類似物；所述系列前列腺素包括PGE₁、PGE₂、PGD₂、PGI₂，所述前列腺素類似物包括利馬前列素、貝前列素。