[發明專利]一種骨髓間充質干細胞的培養基及培養方法在審
| 申請號： | 202110691899.6 | 申請日： | 2021-06-22 |
| 公開（公告）號： | CN113201492A | 公開（公告）日： | 2021-08-03 |
| 發明（設計）人： | 楊美中;路建偉;胡曉川 | 申請（專利權）人： | 浙江三譽生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0775 | 分類號： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人： | 王歡 |
| 地址： | 321000 浙江省金華市婺城區*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 骨髓 間充質 干細胞 培養基 培養 方法 | ||
1.一種骨髓間充質干細胞的培養基，其特征在于，包括：EliteGro-Adv、左旋谷氨酰胺、重組人EGF和基礎培養基。
2.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，包括基礎培養基和如下濃度的組分：
EliteGro-Adv5vol％，左旋谷氨酰胺2mmol/L，重組人EGF10ug/L。
3.根據權利要求1所述的培養基，其特征在于，包括基礎培養基和如下濃度的組分：
EliteGro-Adv5vol％，左旋谷氨酰胺2mmol/L，重組人EGF10ug/L。
4.根據權利要求1～3任一項所述的培養基，其特征在于，所述基礎培養基為DMEM-LG培養基。
5.一種骨髓間充質干細胞的分離培養方法，其特征在于，包括：
將骨髓單細胞懸液經密度梯度離心，收集含單個核細胞的上清液；
將上清液離心重懸后經免疫磁珠分離，獲得骨髓間充質干細胞；
將所述骨髓間充質干細胞接種至權利要求1～4任一項所述的培養基中依次進行原代培養和傳代培養。
6.根據權利要求5所述的分離培養方法，其特征在于，所述密度梯度離心為使用Percoll分離液900g離心30min，所述Percoll分離液的密度為1.073g/ml。
7.根據權利要求5所述的分離培養方法，其特征在于，所述骨髓單細胞懸液和所述Percoll分離液的體積比為l：2。
8.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述免疫磁珠分離的抗體為CD45抗體。
9.根據權利要求5所述的分離培養方法，其特征在于，所述接種的密度為1×104/ml。
10.根據權利要求5所述的分離培養方法，其特征在于，所述原代培養和傳代培養為5％CO2、37℃恒溫培養；所述原代培養和繼代培養的過程中每2～5天換液一次。
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