[發明專利]一種納米抗體及其應用

有效

• 申請號: 202110691663.2
• 申請日: 2021-06-22
• 公開（公告）號: CN113416248B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發明（設計）人: 韓根成;楊鵬輝;李葛;李宇翔;莫榮亮;郝瑩;侯春梅;馮健男
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C12N15/13;C12N15/70;C12N15/10;C40B50/06;C40B40/02;A61K39/40;A61K47/68;A61P31/04;G01N33/569;G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 高倩倩;李紅偉

本發明公開了一種納米抗體及其應用，所述納米抗體具有如SEQ ID NO.1～3所示的CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列。本發明同時提供了編碼所述單克隆抗體的核酸分子、含有所述核酸分子的表達載體和宿主細胞。本發明的納米抗體具有較高的結合活性以及中和活性。

技術領域

本發明屬于細胞免疫學、基因工程領域，涉及一種納米抗體及其應用。

背景技術

金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是一種革蘭陽性細菌，主要起源于環境和食物，可引發多種感染，例如膿皰病、中毒性休克綜合癥、肺炎、化膿性關節炎、心內膜炎和自身免疫性疾病(如紅斑狼瘡)(F.D.Lowy.Staphylococcus aureusinfections.N.Engl.J.Med.,1998,339(8):520-532.)。金黃色葡萄球菌特別是耐藥菌株在醫院感染的高發病率和高死亡率，給全世界的醫療保健造成了巨大負擔。盡管引入了針對金黃色葡萄球菌的新抗生素，但耐藥性的快速出現表明仍需要開發對細菌的進化適應不施加選擇性壓力的新型治療方法來對抗金葡菌感染相關疾病。

金黃色葡萄球菌能夠表達廣泛的毒力因子，從而逃避宿主免疫反應，并引發多種疾病。金黃色葡萄球菌感染的發病機理取決于生產的表面蛋白能夠調節細菌黏附于宿主組織，分泌的一系列細胞外毒素和酶能夠破壞宿主細胞和組織，避開宿主的免疫防御，使細菌在宿主細胞中生長和擴散(M.E.Powers,J.Bubeck Wardenburg.Igniting the fire:Staphylococcus aureus virulence factors in the pathogenesis of sepsis.PLoSPathog.,2014,10(2):e1003871.)。外毒素是金黃色葡萄球菌在指數后期和早期靜止期分泌到細胞外基質中的蛋白質，它們能參與組織滲透，使細菌入侵宿主，還能溶解細胞作用，從中獲取必要的營養物質幫助細菌生長。金黃色葡萄球菌分泌的常見外毒素包括溶血素、白斑毒素、去角質毒素、腸毒素(Staphylococcal enterotoxin,SE)和中毒性休克綜合征毒素-1(Toxic shock syndrome toxin-1，TSST-1)(C.Kong,H.Neoh,S.Nathan.TargetingStaphylococcus aureus Toxins:A Potential form of Anti-VirulenceTherapy.Toxins(Basel),2016,8(3).)。

SE可引起嘔吐和腹瀉，是食源性疾病的最常見原因之一。SE根據抗原異質性進行分型，目前已鑒定的SE有20多種(N.Balaban,A.Rasooly.Staphylococcalenterotoxins.Int.J.Food Microbiol.,2000,61(1):1-10.)。SE是啟動T細胞活化和增殖的超抗原，其中葡萄球菌腸毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)是研究最深多的SE之一，被美國疾病控制和預防中心列為B級生物戰劑，使其成為開發抗毒素中和抗體的潛在靶標。SEB直接與抗原呈遞細胞表面的主要組織相容性復合物II類分子(MHC II)和T細胞受體(TCR)特定Vβ區結合，導致單核/巨噬細胞和T淋巴細胞均過度活化。活化的宿主細胞會產生大量促炎性細胞因子和趨化因子，從而激活炎癥和凝血反應，導致發熱、低血壓和休克等臨床癥狀。

針對SEB目前沒有批準的疫苗或者特定的藥物治療，目前的研究提出了多種治療方法，包括小分子治療劑，針對SEB的疫苗，以及SEB靶向單克隆抗體。基于抗體藥物為核心的被動免疫治療MRSA感染具有巨大的發展應用前景，將可成為“非抗生素”治療MRSA感染和控制耐藥性發展新的免疫防治手段。