[發明專利]一種原位負載聚多巴胺的殼聚糖復合支架材料及其制備方法

有效

• 申請號: 202110691020.8
• 申請日: 2021-06-22
• 公開（公告）號: CN113384756B
• 公開（公告）日: 2022-07-08
• 發明（設計）人: 陳景帝;耿玉生;徐敢;楊一凡;閆匡奇;王玉鑫
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: A61L27/56
• 分類號: A61L27/56;A61L27/50;A61L27/12;A61L27/18;A61L27/20
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 俞舟舟;蔡學俊

1.一種原位負載聚多巴胺的殼聚糖復合支架材料的制備方法，其特征在于：由殼聚糖和鹽酸多巴胺相互融合構成支架主體多級分層結構，可溶性鈣鹽與可溶性磷酸鹽作為無機相納米羥基磷灰石的前驅體，采用碳酸銨擴散法誘導鹽酸多巴胺自聚合，使材料表面原位負載聚多巴胺，后經Tris溶液處理，原位仿生構建納米羥基磷灰石摻雜的骨修復支架材料；

包括以下步驟：

（1）稱取1 g的殼聚糖溶于50 ml的乙酸溶液中，置于恒溫水浴鍋中攪拌使其溶解，配置2 wt%的殼聚糖溶液；

（2）稱取一定量的鹽酸多巴胺，加入步驟（1）所得的殼聚糖溶液，恒溫水浴攪拌使其溶解，混合均勻；

（3）將濃度為2 mol/L可溶性鈣鹽溶液和1.2 mol/L可溶性磷酸鹽溶液各2 ml依次加入步驟（2）所得的殼聚糖和鹽酸多巴胺的混合溶液，恒溫水浴充分攪拌，混合均勻，即得支架前驅體溶液；

（4）將步驟（3）所得的支架前驅體溶液加入模具中，將模具先放于4 ℃過夜，后放于-20℃冷凍24 h，隨后真空冷凍干燥；

（5）取容積為500 ml的燒杯，在燒杯底部放入裝有碳酸銨粉末的培養皿，后將冷凍干燥得到的支架材料放入燒杯中，用鋁箔紙將支架材料與碳酸銨粉末分隔開，用封口膜將燒杯口密封，將燒杯放置于恒溫培養箱中；

（6）將步驟（5）所得處理后支架材料，浸泡于250~500 ml的乙醇/Tris混合溶液中，并置于37 ℃恒溫搖床中浸泡8~10 h后，用大量二次水沖洗，洗至中性，去除支架內殘余的Tris成分，將支架材料放于-20 ℃冷凍，后冷凍干燥，即得原位負載聚多巴胺的殼聚糖復合支架；

步驟（5）中所述的碳酸銨的用量為5 g，鋁箔紙上扎有小孔，便于碳酸銨分解后產生的氨氣與支架材料相接觸，使支架材料處于堿性的氣體氛圍，促進聚多巴胺的生成，恒溫烘箱的溫度為37 ℃，放置時間48 h。

2. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（1）、（2）、（3）中所述的水浴的溫度均為37 ℃，步驟（1）所用的乙酸溶液的乙酸體積分數為1 %，攪拌時間為2~3 h，使殼聚糖完全溶于乙酸溶液中。

3. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（2）中所述的鹽酸多巴胺的加入量為殼聚糖質量的10%~30%，攪拌時間為1 h。

4. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（3）中所用可溶性鈣鹽為硝酸鈣或氯化鈣；所用可溶性磷酸鹽為磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉或磷酸二氫鈉；其中Ca/P摩爾比為n(Ca²⁺):n(PO₄^3-)=1.67:1，攪拌時間為3~4 h。

5. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（4）和（6）中冷凍干燥的溫度為-80 ℃，冷凍干燥時間為48 h。

6. 根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟（6）中所述的乙醇/Tris混合溶液是將無水乙醇和Tris溶液按照體積比1:1進行混合，無水乙醇的揮發性有利于支架材料與溶液充分接觸，使晶體原位均勻轉化，所用的Tris溶液的濃度為10 mmol/L，搖床轉速為100 r/min。

7.如權利要求1-6任一所述的制備方法制得的原位負載聚多巴胺的殼聚糖復合支架材料。