[發明專利]一種快速檢測物質化感作用的方法

在審

• 申請號: 202110689625.3
• 申請日: 2021-06-22
• 公開（公告）號: CN113447615A
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發明（設計）人: 柏連陽;楊浩娜;王立峰;鄔臘梅;周小毛;曾浩
• 申請（專利權）人: 湖南省農業生物技術研究所;湖南農業大學
• 主分類號: G01N33/00
• 分類號: G01N33/00
• 代理公司: 長沙和雅知識產權代理事務所(普通合伙) 43238
• 代理人: 林傳貴

本發明屬于生物測定技術領域，具體涉及一種快速檢測物質化感作用的方法，包括如下操作步驟：(1)受體植物催芽，(2)配制培養基，(3)培養基轉移，(4)受體植物培養，(5)讀取數據，(6)計算化感效應指數。本發明能節省受體植物根長和芽長的測量時間，在短時間內大量統計測量待測化學物質的化感作用。

技術領域

本發明涉及生物測定技術領域，特別是一種快速檢測物質化感作用的方法。

背景技術

化感作用是指植物或微生物的代謝分泌物對環境中其他植物或微生物有利或不利的作用。植物化感作用的媒體是化學物質，被稱為化感物質(Allelochemical)。化感物質(Allelochemical)是生物體內產生的非營養性物質，能影響其他植物生長、健康、行為或群體關系，主要是植物的次生代謝物質。近年來,有關植物化感作用的研究十分活躍,通過這一研究不僅可以很好的指導生產實踐,實現農業生態系統的良性循環,建立合理的栽培技術和耕作制度,而且可以以植物化感作用為理論依托,從植物組織中尋找具有抑制雜草生長的天然除草活性物質,進而進行仿生除草劑的研究與開發。

現常用測定植物化感作用的方法，一種以植物材料為直接檢測物質，常用瓊脂混合植物材料，進行待測受體植物培養，培養一定時間后，用游標卡尺或其它測量工具進行測量受體植物的根長、芽長。另一種是以植物提取物或化學物質為檢測物質，常用水溶液培養皿法檢測，培養一定時間后，用測量工具測量受體植物的根長和芽長。但在進行大批量化感物質測定時，根長和芽長測量工作量大，需要大量的人力、物力。國知局公開的專利文件中，CN102172128A專利申請公開了一種植物根系分泌物的化感潛力的生物測定方法，以及CN102257947A專利申請公開了一種具有抑草功能的水稻的實驗室快速篩選方法，這兩種方法中受體植物均為在培養皿中培養，結果測定時，需要人工手動測量結果。

發明內容

針對現有物質化感作用測定試驗耗費時間、人力、物力等技術問題，本發明的目的是提供一種快速檢測物質化感作用的方法，該方法能節省受體植物根長和芽長的測量時間，在短時間內大量統計測量待測物質的化感作用。

為達到上述目的，主要提供如下技術方案：

一種快速檢測物質化感作用的方法，包括以下步驟：

(1)受體植物催芽：將受體植物A的種子消毒后，放入培養皿內催芽至剛露白；

(2)配制培養基：配制質量百分濃度為1.0-1.8％的瓊脂水溶液，待配好的瓊脂水溶液溫度降至60℃±5℃時，加入待測化學物質B，配制后的最終瓊脂質量百分濃度高于1.0％；

(3)培養基轉移：配好后，用移液槍吸取8-9ml的瓊脂水溶液至15ml離心管中；蓋緊離心管蓋，橫面旋轉離心管，將離心管平放在桌面上；待瓊脂完全冷凝后，用鑷子輕壓瓊脂面，旋轉離心管，使瓊脂面正對離心管刻度面；

(4)受體植物培養：將受體植物A種子根露白處朝下，使種子緊貼瓊脂面；每個離心管平行放入2-4粒種子，擺放在同一水平高度，每個處理重復3-5管；將離心管豎直插入試管架中，放入光照培養箱內；

(5)讀取數據：培養完成后取出離心管，平視離心管刻度面，透過離心管按照離心管刻度格，以每0.5ml刻度為一個測量單位，快速讀取受體植物A的根長和芽長；

(6)計算化感效應指數：

以未添加化學物質B的同樣質量百分濃度的瓊脂培養基培養的受體植物A為對照；化感效應指數的公式為：

RI＝T/C-1；

式中C為對照根長或芽長，T為處理根長或芽長；根據化感效應指數快速判定化學物質B的化感作用。

作為優選，所述步驟(1)中受體植物A為中小型植物。

作為優選，所述步驟(2)中化學物質B為不易揮發類物質，包括單一化學物質或混合物質。