[發(fā)明專利]一種番茄灰霉病菌分生孢子的移植與分散方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110688358.8
• 申請日: 2021-06-15
• 公開（公告）號: CN113308431B
• 公開（公告）日: 2022-09-16
• 發(fā)明（設計）人: 張君成;張正淳;王忠文
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C12N3/00
• 分類號: C12N3/00;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種番茄灰霉病菌（ Botrytis cinerea） 分生孢子的移植與分散方法，其特征是，從產(chǎn)孢菌落上吸取孢子并直接移植分散到觀測平板上，孢子移植與分散的操作步驟如下：

1)準備工具：將普通棉簽包裝于不銹鋼杯內(nèi)，常規(guī)高溫滅菌后，備作番茄灰霉病菌孢子移植與分散用工具；

2)準備產(chǎn)孢菌落：用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，進行番茄灰霉病菌的產(chǎn)孢培養(yǎng)，直至產(chǎn)孢平板上形成大量的分生孢子；

3)準備培養(yǎng)平板：用常規(guī)瓊脂培養(yǎng)基制備孢子培養(yǎng)觀測平板，用滅菌刀片將培養(yǎng)皿倒制的瓊脂平板切成長條狀，并將切成的瓊脂條挑轉(zhuǎn)到滅菌載玻片上，作為分生孢子培養(yǎng)觀測平板；

4)碰觸吸取孢子：取步驟1)準備的滅菌棉簽，將端部棉球碰觸步驟2)準備的產(chǎn)孢菌落，棉球接觸面吸附菌落上的孢子；

5)減除密集孢子：將步驟4)碰觸吸附孢子后的棉球轉(zhuǎn)移到空白瓊脂平板上點印，減除及稀釋棉球上吸附的密集孢子；

6)分散釋放孢子：將步驟5)減除及稀釋孢子后的棉簽棉球，在步驟3)準備的孢子培養(yǎng)觀測平板面的不同位置作有序連續(xù)點印，釋放棉球上的孢子，得到孢子數(shù)量相近、且孢子分散性良好的孢子印跡；

7)觀察孢子萌發(fā)生長：將步驟6)得到載有孢子印跡的培養(yǎng)平板放入具有保濕效果的有蓋搪瓷盆內(nèi)，置于工作設定的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，按工作要求觀察與測定這些分生孢子的萌發(fā)與生長特征。