[發明專利]一種治療脂溢性脫發的干細胞制劑

在審

• 申請號: 202110684801.4
• 申請日: 2021-06-21
• 公開（公告）號: CN113332313A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 宋珂慧;李媛媛;郭偉;羅昀
• 申請（專利權）人: 濟南賽爾生物科技股份有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K35/51;A61P17/14;C12N5/0775
• 代理公司: 山東瑞宸知識產權代理有限公司 37268
• 代理人: 杜超

1.一種治療脂溢性脫發的干細胞制劑，其特征在于：其由如下重量份的原料混合而成：

干細胞培養濃縮液 8.5-9.5

甘油 0.3-0.7

丙二醇 0.1-0.3

乙醇 0.2-0.4。

2.根據權利要求1所述的一種治療脂溢性脫發的干細胞制劑，其特征在于，各原料的重量份為：

干細胞培養濃縮液 8.7-9.2。

3.根據權利要求2所述的一種治療脂溢性脫發的干細胞制劑，其特征在于，各原料的重量份為：

干細胞培養濃縮液 9

甘油 0.5

丙二醇 0.2

乙醇 0.3。

4.根據權利要求1任一項所述的一種治療脂溢性脫發的干細胞制劑，其特征在于，所述原料中還包括含量為1.5×10^-5-5.0×10^-5mol/L的殼聚糖。

5.根據權利要求4所述的一種治療脂溢性脫發的干細胞制劑，其特征在于，所述原料中還包括含量為3×10^-5-3.5×10^-5mol/L的殼聚糖。

6.根據權利要求1或5中任一項所述的一種治療脂溢性脫發的干細胞制劑，其特征在于，所述的干細胞培養濃縮液采用如下的方法制備而成：

S1 取臍帶，洗滌至無血跡；兩頭各剪掉1cm后，把臍帶剪成2-3cm的小段，再次洗滌至無血跡；

S2 取出臍帶中的華通膠，剪至1±0.1mm³大小；移至培養瓶中放入37℃、5%CO₂的培養箱內培養過夜；

S3 吸取15ml原代細胞培養基于培養瓶中；于37℃、5%CO₂的培養箱內培養，每7天換一次液，并在倒置顯微鏡下觀察細胞的形態和生長情況，至細胞融合度達70-80%止，此為P0代臍帶間充質干細胞；

S4 繼續培養P0代臍帶間充質干細胞的融合度達到80-90%時，進行細胞傳代培養：將培養瓶的舊培養基吸棄，加入10ml生理鹽水洗滌兩遍；棄掉生理鹽水，加入2ml細胞消化液，放入培養箱消化1min；加入10ml細胞傳代培養基終止消化，將細胞收集到離心管；

S5 1200rpm/min離心8min；

S6 吸棄培養基，重新加入10ml細胞傳代培養基重懸，按8×10⁴個細胞/ml進行傳代培養；

S7 培養至P3代，添加含有5ng/ml重組靈芝免疫調節蛋白的無血清培養基繼續培養72h，收集培養誘導后的細胞培養原液；

S8 采用低溫超速離心的方式對細胞培養原液進行濃縮，超速離心時選用截留30 KD分子量蛋白的濾網進行濃縮，得到濃縮液即為干細胞培養濃縮液。