[發(fā)明專利]一種高效新型雞卵白蛋白螯合鋅的制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202110677105.0
• 申請日: 2021-06-18
• 公開（公告）號: CN113337564A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王銳;王斌;齊軼
• 申請（專利權(quán)）人: 山東博瑞科生物技術(shù)有限責(zé)任公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/77;C07K1/107;A23K20/20;A23K20/147
• 代理公司: 六安市新圖匠心專利代理事務(wù)所(普通合伙) 34139
• 代理人: 陳斌

本發(fā)明公開了一種高效新型雞卵白蛋白螯合鋅的制備方法，包括以下步驟：(1)雞卵白蛋白收集；(2)酶解；(3)滅活：酶解結(jié)束后，酶解液進(jìn)行加熱20min酶鈍化處理，冷卻至室溫；(4)離心；(5)螯合；(6)濃縮、干燥。本發(fā)明所述的一種高效新型雞卵白蛋白螯合鋅的制備方法，本發(fā)明在工藝上提取和螯合過程在低溫下進(jìn)行，可以充分保留雞卵白蛋白OVA肽螯合鋅配位物的功能性；采用本發(fā)明方法提取的雞卵白蛋白OVA肽純度高，采用優(yōu)化的螯合條件及特定的螯合質(zhì)量比可以使雞卵白蛋白肽和鋅離子充分鰲合，最大限度地提高螯合率；本發(fā)明原料來源要求不高，能達(dá)到既獲得雞卵白蛋白肽生物活性又補(bǔ)充鋅的雙重功效，同時還能提高雞蛋蛋清的附加值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物功能肽螯合金屬離子領(lǐng)域，特別涉及一種高效新型雞卵白蛋白螯合鋅的制備方法。

背景技術(shù)

雞卵白蛋白(ovalbumin，OVA)是蛋清的主要蛋白組分，其含量占蛋清蛋白總量的54％，是一種優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)。OVA的分子質(zhì)量為44.5kDa，是典型的含磷球形的糖蛋白，其等電點(diǎn)為4.5，由385個氨基酸組成。每1個OVA分子含有1個二硫鍵和4個巰基，是蛋清蛋白中唯一1個含有游離巰基的蛋白質(zhì)。

OVA制備蛋清源生物活性肽是指對生物機(jī)體的生命活動有益或具有生理作用的肽類化合物，這些肽在母蛋白質(zhì)序列內(nèi)不具有生物活性，但通過體內(nèi)或體外蛋白酶水解或發(fā)酵釋放出來后則可產(chǎn)生活性,活性肽主要有降脂肽、抗菌肽、免疫肽、抗氧化肽等，具有抗菌活性、免疫調(diào)節(jié)活性以及抗氧化活性等

鋅是動物體內(nèi)必不可少的一種微量元素。1、鋅可調(diào)節(jié)動物的生長發(fā)育，其調(diào)節(jié)作用主要通過兩個方面來完成。一是在調(diào)節(jié)動物食欲方面：鋅主要通過提高動物的采食量，促進(jìn)動物對采集飼料的轉(zhuǎn)換消化率，提高動物對飼料的利用率，從而有效促進(jìn)動物的生長。2、鋅在動物體的免疫系統(tǒng)發(fā)育過程中，鋅主要是通過影響機(jī)體的免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫分子來影響整個的免疫系統(tǒng)。動物缺鋅會使免疫器官發(fā)生萎縮。3、碳酸酐酶的一個重要組成成分就是微量元素鋅，在碳酸酐酶中，鋅含量約占0.3％。碳酸酐酶是動物機(jī)體的代謝產(chǎn)物二氧化碳向體外排泄所必需的一種酶。由此可知，鋅在維持動物體內(nèi)環(huán)境酸堿性平衡的過程中，發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。

微量元素鋅作為飼料添加劑共經(jīng)歷了三個階段。第一個階段為無機(jī)鋅類添加劑，主要代表有硫酸鋅、氯化鋅、氧化鋅等。這類無機(jī)鋅在畜牧業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛，但這類無機(jī)鋅穩(wěn)定性差，對動物胃腸道有強(qiáng)烈的刺激作用，動物體對這類無機(jī)鋅的吸收效果不好，消化吸收率很低，在動物的排泄物中有大量的鋅元素，對環(huán)境污染嚴(yán)重。第二個階段為比較簡單的有酸機(jī)鋅類添加劑，其主要代表為葡萄糖酸鋅、檸檬酸鋅、富馬酸鋅等。此類添加劑雖較第一類產(chǎn)品飼喂效果有一定的提升，穩(wěn)定性得到改善，但其穩(wěn)定性依然較差，并且腸道內(nèi)容物對其影響大，吸收率不理想。而且這兩類產(chǎn)品中的鋅離子與機(jī)體內(nèi)的其他微量元素之間容易產(chǎn)生拮抗作用，影響其他微量元素的吸收利用。

為了彌補(bǔ)以上兩種鋅元素添加劑的缺點(diǎn)，世界各國學(xué)者不斷追求新技術(shù)、開發(fā)可替代以上兩代鋅元素添加劑的新產(chǎn)品。在20世紀(jì)80年代初，推出了第三類。添加劑，也就是有機(jī)鋅類添加劑，這類產(chǎn)品主要以氨基酸螯合鋅和小肽螯合鋅等為代表。與第一類和第二類添加劑相比，有機(jī)鋅類添加劑，具有很強(qiáng)的抗干擾能力和穩(wěn)定性，而且還可以很好的被動物體吸收和利用，其消化吸收率極高，生物學(xué)效價遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于無機(jī)鋅類。有機(jī)鋅還具有雙重作用，在補(bǔ)充微量元素的同時其還可以補(bǔ)充氨基酸或小肽。有研究報道稱氨基酸鋅還具有殺菌作用，并可有效改善機(jī)體的免疫功能

雞卵白蛋白(ovalbumin)OVA肽螯合鋅也是一種比較特殊的第三類飼料添加劑，其主要是通過卵白蛋白肽內(nèi)的一些化合物與鋅離子結(jié)合的形式，把游離狀態(tài)的鋅離子轉(zhuǎn)換為結(jié)合態(tài)的鋅離子。相對游離態(tài)的鋅離子而言，結(jié)合態(tài)的雞卵白蛋白肽螯合鋅具有穩(wěn)定、高效、毒性小，在腸道內(nèi)易吸收的顯著優(yōu)勢，而且結(jié)合態(tài)雞卵白蛋白肽螯合鋅的生產(chǎn)成本也比較低。同時還可以給機(jī)體提供補(bǔ)充一定量的氨基酸。因此雞卵白蛋白肽螯合鋅也是一種有較好應(yīng)用前景的有機(jī)鋅，同時又可作為較好的蛋白添加劑，故此，我們提出一種高效新型雞卵白蛋白螯合鋅的制備方法來解決此問題。

發(fā)明內(nèi)容